[发明专利]一种高度灵敏和特异的血液HBV pgRNA荧光定量PCR检测体系和检测方法有效
申请号: | 201710213191.3 | 申请日: | 2017-04-01 |
公开(公告)号: | CN107058623B | 公开(公告)日: | 2020-04-14 |
发明(设计)人: | 鲁凤民;王杰;陈然 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 北京科石知识产权代理有限公司 11595 | 代理人: | 高元吉;朱春野 |
地址: | 100871*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种血液乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(pregenome RNA,pgRNA)荧光定量PCR检测体系,以及利用该检测体系对HBV pgRNA进行检测的方法。所述检测体系包括正向引物,其核苷酸序列如SEQ NO:1所示;反向引物,其核苷酸序列如SEQ NO:2所示;带有随机锚定序列的逆转录引物,其核苷酸序列如SEQ NO:3所示;以及探针,其核苷酸序列如SEQ NO:4所示。采用本发明的检测体系和方法,可用于制备HBV诊断试剂或试剂盒。本发明排除了在检测过程中HBV DNA或其他RNA带来的可能干扰,确保了血液HBV pgRNA检测的特异性。 | ||
搜索关键词: | 一种 高度 灵敏 特异 血液 hbv pgrna 荧光 定量 pcr 检测 体系 方法 | ||
【主权项】:
一种血液HBV pgRNA荧光定量PCR检测体系,包括:反向锚定引物,所述反向锚定引物包括基因特异性引物部分和修饰序列部分,所述基因特异性引物部分为AGGCGAGGGAGTTCTTCTTCTA,位于反向锚定引物的3’末端;优选地,所述修饰序列部分包括酶切位点、标签序列或人工设计的随机序列;进一步优选地,所述反向锚定引物的核苷酸序列如SEQ NO:3所示;更进一步还优选,检测体系还包括正向引物和反向引物。
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