[发明专利]一种杈杷果的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种杈杷果的组织培养方法，利用植物细胞的全能性，选取长势良好果实粗大的植株作为外植体，通过诱导培养、继代培养、生根培养、炼苗移栽等步骤，培养得到杈杷果幼苗，可以大量培育具有优良基因的杈杷果幼苗，控制各个培养阶段的温度、光照、营养素等条件，短时间内可培育出大量的杈杷果植株。

主权项

1.一种杈杷果的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：1)选取长势良好果实粗大的植株，截取8～15mm的带芽茎段或长出不超过7日的嫩叶，用自来水清洗后放入70～75％的乙醇溶液中浸泡20～30s，取出用无菌水清洗3～5次，使用无菌纱布擦干水分后，切成0.4～0.8cm²的小块，得到外植体；2)配置营养液，放入三角烧瓶中，将步骤1)得到的外植体放入营养液，将三角烧瓶置于往复式摇床上进行培养，将摇床速度设置为60～90r/min，每隔2～3d更换一次营养液，直至长出新芽；3)将步骤2)中长出新芽的外植体放入继代培养基中，在18～24℃温度范围内进行变温培养，每日进行1～2h的二氧化碳施肥，并每日进行12h的光照，光照强度为800‑1400Lx，每隔3～4d更换一次继代培养基；4)将步骤3)中长出细根的外植体挑选出来，放入生根培养基中，每日更换生根培养基，并进行6～7h的光照，光照强度为3000～4000Lx，培养温度为20～22℃，直至根系长到3～5cm，得到幼苗；5)将步骤4)得到的幼苗移栽到大棚中，控制棚内温度为25～28℃，光照为日光，栽培介质由细砂、蛭石、甘蔗渣、草炭土按重量比1:1:0.5:0.5混合得到；步骤2)中所述的营养液由以下成分组成：6‑苄氨基嘌呤0.6‑0.8mg/L、6‑糖基氨基嘌呤0.6‑0.8mg/L、IAA0.5‑1mg、2,4二氯苯氧乙酸0.5‑1mg/L、抗坏血酸0.08‑0.1g/L、活性炭0.1‑0.5g/L、大蒜汁15‑25g/L；步骤3)中所述的继代培养基由以下成分组成：琼脂10‑12g/L、聚乙烯醇0.1‑0.15g/L、脱落酸0.1‑0.15mg/L、甘蔗汁8‑12g/L、2,4二氯苯氧乙酸2‑2.2mg/L、6‑苄氨基嘌呤0.4‑0.6mg/L；步骤4)中所述的生根培养基由以下成分组成：IAA2‑2.2mg/L、KT1.8‑2mg/L、碳酸钙1.5‑3g/L、硫酸镁0.2‑0.3g/L、酵母粉0.4‑0.6g/L、琼脂12‑15g/L、牛肉膏0.3‑0.4g/L。