[发明专利]一种酵母培养物中甘露聚糖含量的测定方法

摘要

一种酵母培养物中甘露聚糖含量的测定方法，包括以下主要步骤：(1)酵母培养物进行预处理使其中的酵母细胞壁破壁；(2)预处理后的样品在酸性条件下进行水解反应；(3)样品水解反应后的溶液酸碱度调成中性后，与相应的衍生化试剂在一定条件下进行衍生化反应，同时甘露糖标准溶液在相同条件下进行衍生化反应；(4)以甘露糖为标准品溶液，衍生化后的样品和衍生化后的标准品溶液经反相高效液相色谱进行分析检测；(5)根据得到的色谱数据计算出样品中甘露糖的质量，再换算成甘露聚糖的含量。本发明可准确测定酵母培养物中的甘露聚糖含量，干扰小，专一性高。

主权项

1.一种酵母培养物中甘露聚糖含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将酵母培养物进行预处理使其中的酵母细胞壁破壁；(2)将步骤(1)中所述预处理后的样品在酸性条件下进行水解反应；(3)将步骤(2)中所述水解反应后溶液的酸碱度调成中性后，与相应的衍生化试剂在一定条件下进行衍生化反应；然后以甘露糖为标准品，将其标准品溶液在相同条件下进行衍生化反应；(4)将步骤(3)中所述衍生化后的样品溶液和标准品溶液经反相高效液相色谱进行分析检测；(5)根据步骤(4)中所得到的色谱数据计算出样品中甘露糖的质量，再换算成甘露聚糖的含量；其中，步骤(1)中，所述酵母细胞壁破壁是采用酶解处理，所述酶解处理是是将酵母培养物和超纯水以1:4～1:10的比例混匀后，β‑葡聚糖酶和蜗牛酶按比例3:1添加，添加量在5～13mg/mL，酶解pH 4.0～6.0，酶解温度40～60℃，酶解时间2～8h；其中，步骤(3)中，所述衍生化试剂为1‑苯基‑3‑甲基‑5‑吡唑啉酮；其中，步骤(4)中，所述反相高效液相色谱的色谱条件是以0.1mol/L pH5.5乙酸铵缓冲液与乙腈按照体积比80/20～60/40组成流动相洗脱，流速为0.5～1.5mL/min，反相色谱柱选用C18柱分离，紫外检测器在紫外波长250nm下检测。