[发明专利]一株可以高效分泌纳豆激酶的枯草芽孢杆菌株及高纯纳豆激酶制备工艺在审
| 申请号： | 201710221567.5 | 申请日： | 2017-04-06 |
| 公开（公告）号： | CN107058204A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 张建华;崔青;龚文秀;钱丙俊;李希强;姚晓敏;王杰;刘华奇 | 申请（专利权）人： | 上海诺金科生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/75;C12N9/54;C12R1/125 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所31272 | 代理人： | 周云 |
| 地址： | 201201 上海市浦东新区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一株可以高效分泌纳豆激酶的枯草芽孢杆菌菌株，利用PCR技术扩增纳豆枯草芽孢杆菌NK的aprN基因，并依据枯草芽孢杆菌的密码子偏爱性优化了起始30个氨基酸的密码子，构建重组表达质粒pHT01‑aprN，经限制性酶切、PCR扩增和测序验证其正确性。通过电击法将pHT01‑aprN导入枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)，利用氯霉素抗性筛选获得工程菌。优化发酵条件后，经IPTG诱导表达，摇床培养发酵液中最高酶活为289U/ml，高密度发酵发酵液中最高酶活达到7778U/ml，经亲和柱层析制备高纯纳豆激酶酶制剂最高酶活为981731U/g。 | ||
| 搜索关键词： | 可以 高效 分泌 激酶 枯草 芽孢 杆菌 高纯 制备 工艺 | ||
【主权项】：
一株可以高效分泌纳豆激酶的枯草芽孢杆菌工程菌株，其特征在于，所述菌株的分类命名为：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，保藏编号为CGMCC No：13496，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2016年12月26日。
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