[发明专利]一种用于荧光定量PCR检测的快速提取核酸方法在审
| 申请号： | 201710234694.9 | 申请日： | 2017-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN106987587A | 公开（公告）日： | 2017-07-28 |
| 发明（设计）人： | 卿志荣;田青 | 申请（专利权）人： | 江苏睿玻生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68 |
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| 地址： | 江苏省南通市 南通高*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于荧光定量PCR检测的快速提取核酸方法。该方法适用于提取支原体、革兰氏阴性菌、病毒等病原微生物的DNA，提取产物DNA可用于荧光定量PCR检测。该发明将含有支原体、革兰氏阴性菌、病毒等病原微生物的样本用生理盐水洗一次，在沉淀中加入pH11‑12的含5％Chelex‑100、0.5％NP‑40、0.5％Triton X‑100、1mM EDTA的溶液，重悬，80‑90℃加热10min，12000rpm离心5min，取上清用于荧光定量PCR检测。与现有的核酸提取方法比较操作简单、快速，避免样本之间交叉污染的现象，并且提高样本的DNA得率，提高了荧光定量PCR的扩增效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 荧光 定量 pcr 检测 快速 提取 核酸 方法 | ||
【主权项】：
一种应用于荧光定量PCR的快速核酸提取方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：(1)取少量生物样本，所述生物样本选自血斑、精斑、精液、组织液样本、脑脊液样本、尿液样本、积液样本、组织细胞样本；(2)将样本10000‑13000rpm离心3‑10min，弃上清；(3)加入1ml生理盐水重悬沉淀，10000‑13000rpm离心3‑10min，弃上清；(4)在沉淀中加入含5％Chelex‑100、0.5％‑1％NP40、0.5％‑1％TritonX‑100、1mMEDTA、pH＝9‑12的核酸提取液，重悬沉淀；(5)80‑90℃下加热5‑15min；(6)10000‑13000rpm离心3‑10min，收集上清为用于PCR反应。
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