[发明专利]一种白牛筋木的组培增殖方法

摘要

本发明公开了一种白牛筋木的组培增殖方法，具体步骤包括外植体的选取、外植体的灭菌、无菌系建立和继代增殖；外植体的选取是在3月至5月的晴好天气，剪取牛筋条当年生营养枝的幼嫩茎段或茎尖；外植体的灭菌是剪去嫩茎上的叶片，用洗洁精清洗茎段或茎尖，再用自来水冲洗干净，将茎段或茎尖放入超净工作台中，用75%的酒精浸泡30s，再用灭过菌蒸馏水将酒精冲洗干净，再放入0.1%的升汞溶液中浸泡20‑30min，然后用无菌水清洗4次。本发明采用组织培养增殖方法，为大批量育苗，降低育苗成本，提高育苗效率奠定基础。

主权项

1.一种白牛筋木的组培增殖方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）外植体的选取：在3月至5月的晴好天气，剪取白牛筋木当年生营养枝的幼嫩茎段；（2）外植体的灭菌：剪去嫩茎上的叶片，用洗洁精清洗茎段，再用自来水冲洗干净，将茎段放入超净工作台中，用75%的酒精浸泡30s，再用灭过菌蒸馏水将酒精冲洗干净，再放入0.1%的升汞溶液中浸泡20‑30min，然后用无菌水清洗4次；（3）无菌系建立：无菌系的建立采用的基本培养基是MS培养基，使用的激素为6BA和NAA，将培养基装入广口瓶中，每瓶装入培养基30‑40ml，密封后进行高温高压灭菌，灭菌后冷却待用；在超净工作台中，将消毒好的茎段剪成长为2cm，然后将剪好的茎段插入灭菌后的培养基中，每瓶培养基插入茎段5‑8个，密封后将其放入培养室进行培养；（4）继代增殖：白牛筋木在经过一段时间的培养后，无菌系建立，继而进行继代增殖培养；继代培养所用培养基为MS+1‑2mg/L6BA+0.05‑0.5%NAA，每瓶培养基为50ml，接入无菌系的茎段3个，密封后放入培养室进行继代培养，每周对培养室进行消毒一次，每20‑25d更换一次培养基，通过一个周期的继代培养，白牛筋木增殖系数达到13‑15。