[发明专利]重组大肠杆菌工程菌的构建及其在生产β-丙氨酸中的应用

摘要

本发明公开了重组大肠杆菌工程菌的构建及其在生产β‑丙氨酸中的应用。本发明所公开的重组大肠杆菌工程菌的构建方法，包括：敲除受体菌的fadR基因、fabF基因、fabH基因和向受体菌中导入mcrC基因、acc基因或基因簇、alkL基因、baat基因和gdh基因以及增强受体菌中fadL基因、fadD基因、sthA基因和atoAC基因簇的表达；受体菌为含有fadR基因、fabF基因和fabH基因的细菌或真菌。实验证明，利用本发明的重组菌以脂肪酸为原料生产β‑丙氨酸的转化率为16.36％，表明，可以利用本发明的重组菌制备β‑丙氨酸。

主权项

1.重组菌的构建方法，包括对受体菌进行甲或乙的改造，得到所述重组菌；所述甲为下述A4和A7；所述乙为A4和A7以及A1、A2、A3、A5、A6和A8这六种中的全部或部分；A1、敲除所述受体菌的脂肪酸降解转录因子fadR基因或抑制除所述fadR基因的表达或抑制所述fadR基因编码的蛋白质的活性；A2、敲除所述受体菌的β‑酮脂酰‑ACP合酶II基因fabF基因或抑制除所述fabF基因的表达或抑制所述fabF基因编码的蛋白质的活性；A3、敲除所述受体菌的β‑酮脂酰‑ACP合酶III基因fabH基因或抑制除所述fabH基因的表达或抑制所述fabH基因编码的蛋白质的活性；A4、增加所述受体菌中丙二酸单酰辅酶A还原酶截短体基因mcrC基因编码蛋白质的含量或增强所述mcrC基因编码蛋白质的活性；A5、增加所述受体菌中乙酰辅酶A羧化酶acc基因或基因簇编码蛋白质的含量或增强所述acc基因或基因簇编码蛋白质的活性；A6、增加所述受体菌中外源烷烃摄入外膜蛋白基因alkL基因编码蛋白质的含量或增强所述alkL基因编码蛋白质的活性；A7、增加所述受体菌中β‑丙氨酸氨基转移酶基因baat基因编码蛋白质的含量或增强所述baat基因编码蛋白质的活性；A8、增加所述受体菌中谷氨酸脱氢酶基因gdh基因编码蛋白质的含量或增强所述gdh基因编码蛋白质的活性；所述受体菌为含有所述fadR基因、所述fabF基因和所述fabH基因的细菌或真菌。