[发明专利]苯酚降解菌的培养方法

摘要

本发明涉及一种苯酚降解菌的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备苯酚降解菌培养基；(2)将苯酚降解菌活化在苯酚降解菌培养基中；(3)用移液枪取稀释好的苯酚降解菌溶液分别200微升等。本发明的优点是：经过本发明培养的苯酚降解菌，能够有效的去除苯酚物质，而且不会污染环境。

主权项

一种苯酚降解菌的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备苯酚降解菌培养基，具体制备方法如下：硫酸铵1g/L，磷酸氢二钾0.2g/L，硫酸镁0.05g/L，苯酚0.5g/L，琼脂18g/L，按照成分比例制备苯酚降解菌培养基，并在微波炉加热，加热时间：2min，加热温度：80℃，至琼脂完全融化为止，放入高压灭菌锅进行灭菌，灭菌温度121℃，时间30min，然后在生物安全柜内倒入已灭菌的干燥培养皿内，每个培养皿倒入15ml，将倒好培养基的培养皿放在安全柜内至冷却，冷却时间：5h，冷却温度：室温25℃，冷却后可放入冰箱冷藏备用；(2)将苯酚降解菌活化在苯酚降解菌培养基中，然后在超净工作台内对苯酚降解菌进行平板涂布，同时将苯酚降解菌溶液浓度进行梯度稀释，分别稀释到10的‑2次方，10的‑4次方、10的‑6次方以及10的‑8次方。(3)用移液枪取稀释好的苯酚降解菌溶液分别200微升，分别注入在培养皿内的苯酚降解菌培养基上，用涂布棒将苯酚降解菌溶液涂布均匀，并用记号笔在培养皿的底部进行标注，然后放入35℃的恒温培养箱中，进行培养，1‑2天后，观察苯酚降解菌的生长情况，用记号笔分别划出培养基上生长的不同形态的苯酚降解菌，并标注序号，然后对标注的苯酚降解菌进行平板划线；(4)将划好的平板放入恒温培养箱，35℃，培养1‑2天，观察平板上苯酚降解菌的生长，并对生长好的苯酚降解菌进行染色镜检，记录其形态特征，重复该操作，直至显微镜下观察的苯酚降解菌形态完全纯化为止，将纯化的苯酚降解菌进行在试管斜面培养基中进行斜面划线保藏。