[发明专利]亚硝酸盐降解菌的培养方法

摘要

本发明涉及一种亚硝酸盐降解菌的培养方法，包括以下步骤(1)制备营养琼脂培养基，(2)将亚硝酸盐降解菌活化在营养肉汤培养基中，所(3)用移液枪取稀释好的亚硝酸盐降解菌溶液分别200微升。本发明的优点是经过本发明培养的亚硝酸盐降解菌，能够有效的去除亚硝酸盐，而且不会污染环境。

主权项

一种亚硝酸盐降解菌的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备营养琼脂培养基，具体制备方法如下：称取蛋白胨10份，牛肉膏粉5份，琼脂粉18份，氯化钠5份，按照配比进行混合，混合后在微波炉中加热，加热时间：1‑2min，加热温度：70‑80℃，至琼脂粉完全融化为止，放入高压灭菌锅进行灭菌，灭菌温度121℃，时间30min，然后在生物安全柜内倒入已灭菌的干燥培养皿内，每个培养皿倒入15ml，将倒好培养基的培养皿放在安全柜内至冷却，冷却时间：4‑5h，冷却温度：室温25℃，冷却后可放入冰箱冷藏备用；(2)将亚硝酸盐降解菌活化在营养肉汤培养基中，所述营养肉汤培养基的制备方法如下：称取蛋白胨10份，牛肉膏粉3份，氯化钠5份，然后混合，混合后放入30℃的恒温培养箱培养2天，然后在超净工作台内对肉汤培养基中已活化并生长好的亚硝酸盐降解菌进行平板涂布，同时将亚硝酸盐降解菌溶液浓度进行梯度稀释，分别稀释到10的‑2次方，10的‑4次方、10的‑6次方以及10的‑8次方。(3)用移液枪取稀释好的亚硝酸盐降解菌溶液分别200微升，分别注入在培养皿内的营养琼脂培养基上，用涂布棒将亚硝酸盐降解菌溶液涂布均匀，并用记号笔在培养皿的底部进行标注，然后放入35℃的恒温培养箱中，进行培养，1‑2天后，观察营养琼脂培养基上亚硝酸盐降解菌的生长情况，用记号笔分别划出培养基上生长的不同形态的亚硝酸盐降解菌，并标注序号，然后对标注的亚硝酸盐降解菌进行平板划线；(4)将划好的平板放入恒温培养箱，35℃，培养1‑2天，观察平板上亚硝酸盐降解菌的生长，并对生长好的亚硝酸盐降解菌进行染色镜检，记录其形态特征，重复该操作，直至显微镜下观察的亚硝酸盐降解菌形态完全纯化为止，将纯化的亚硝酸盐降解菌进行在试管斜面培养基中进行斜面划线保藏。