[发明专利]一种mcr‑1阳性细菌的筛选方法有效
申请号: | 201710249684.2 | 申请日: | 2017-04-17 |
公开(公告)号: | CN106967812A | 公开(公告)日: | 2017-07-21 |
发明(设计)人: | 张嵘;黄子衔;王汉宇;陈声;黄卓桉;方颍 | 申请(专利权)人: | 张嵘 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司33200 | 代理人: | 邱启旺 |
地址: | 310009*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种肠道/环境样本中筛选出质粒或者染色体介导多粘菌素耐药基因mcr‑1的细菌的方法。将样本增菌后,进行直接PCR检测,将mcr‑1阳性的肉汤样本再进一步进行増菌、筛选分纯,分纯后的细菌通过PCR检测mcr‑1,筛选出mcr‑1阳性细菌;本发明首先得到mcr‑1阳性的肉汤,避免含药平板筛选方法中因PmrA/PmrB和PhoP/PhoQ双组份调控系统介导多粘菌素耐药细菌造成的干扰,其次仅将mcr‑1阳性肉汤样本接种至含药肠道增菌肉汤及平板,且经过含药肠道增菌肉汤及平板再次筛选,减少分纯及后期分纯细菌的PCR工作量,可应用在肠道/环境样本筛选耐药基因mcr‑1阳性细菌。 | ||
搜索关键词: | 一种 mcr 阳性 细菌 筛选 方法 | ||
【主权项】:
一种mcr‑1阳性细菌的筛选方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:步骤1:将肠道/环境样本接种到营养肉汤中进行增菌;步骤2:对步骤1増菌后的肉汤进行直接PCR检测;步骤3:将mcr‑1阳性的肉汤样本再进一步接种在含药肉汤进行増菌;步骤4:将步骤3得到的增菌液接种到含药平板上进行筛选分纯;步骤5:分纯后的细菌通过PCR检测mcr‑1,筛选出mcr‑1阳性细菌。
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