[发明专利]一种大肠杆菌外膜囊泡的制备、载药方法与其在抗肿瘤中的应用

摘要

本发明公开了一种大肠杆菌外膜囊泡的制备、载药方法与其在抗肿瘤中的应用。所述大肠杆菌外膜囊泡的制备如下体外培养使用LB培养基，培养大肠杆菌BL21菌株，随后经离心、过滤、超滤处理后获得不含大肠杆菌的上层培养液，最终使用超速离心机离心上层培养液，制备大肠杆菌外膜囊泡，所制备得到的大肠杆菌外膜囊泡粒径均一，大约为50nm左右。通常情况下，细菌外膜囊泡的产量低，载药困难。本发明研究出一种全新的针对细菌外膜囊泡的载药方法，使其能够显著提高携载抗肿瘤药物的效率，从而增加对肿瘤细胞增殖与侵袭的抑制作用，显现出细菌外膜囊泡作为新型非病毒药物载体良好的应用前景。

主权项

一种大肠杆菌外膜囊泡的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体如下：(1)收集体外培养的大肠杆菌溶液。(2)将大肠杆菌溶液在0‑25℃下离心弃去沉淀，用滤膜过滤上清液，获得无细菌上清液。(3)用超滤管浓缩步骤(2)得到的无细菌上清液，浓缩后的体积为浓缩前的1/50‑1/4。(4)将浓缩后的无细菌上清液在0‑25℃下超速离心，弃去上清，沉淀以PBS缓冲液重悬，重复超速离心、弃去上清液、沉淀重悬于PBS缓冲液，最后即得细菌外膜囊泡。