[发明专利]一种重组表达制备EV71衣壳蛋白的方法在审
| 申请号： | 201710255172.7 | 申请日： | 2017-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN108728489A | 公开（公告）日： | 2018-11-02 |
| 发明（设计）人： | 张征田;杜瑞卿;夏敏 | 申请（专利权）人： | 南阳师范学院 |
| 主分类号： | C12N15/866 | 分类号： | C12N15/866;C07K14/085;C07K1/22 |
| 代理公司： | 北京思格颂知识产权代理有限公司 11635 | 代理人： | 陶健 |
| 地址： | 473007 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组表达制备EV71衣壳蛋白的方法，在EV71的VP1蛋白第62‑63个氨基酸之间插入His‑FLAG双亲和标签，再通过杆状病毒表达系统、Sf9细胞在无血清培养基中表达重组蛋白EV71，并利用亲和柱层析纯化得到重组蛋白EV71衣壳蛋白VP1。本发明方法通过His FF的纯化一步就得到了可溶性的EV71蛋白，免除了之前传统繁复的CsCl2密度梯度离心的纯化方法，且得率比之前提到了3倍，为之后EV71亚单位疫苗的研制打下了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 衣壳蛋白 重组表达 制备 杆状病毒表达系统 表达重组蛋白 密度梯度离心 无血清培养基 亲和柱层析 亚单位疫苗 重组蛋白 氨基酸 得率 蛋白 标签 | ||
【主权项】：
1.一种重组表达制备EV71衣壳蛋白的方法，其特征在于，在EV71的VP1蛋白第62‑63个氨基酸之间插入His‑FLAG双亲和标签，再通过杆状病毒表达系统、Sf9细胞在无血清培养基中表达重组蛋白EV71，并利用亲和柱层析纯化得到重组蛋白EV71衣壳蛋白VP1。
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