[发明专利]一种硫化铜/二氧化硅双重减弱硫化镉/碳掺杂二氧化钛胰岛素光电化学传感器的制备方法

摘要

本发明属于纳米功能材料、免疫分析及生物传感技术领域。提供一种硫化铜/二氧化硅双重减弱硫化镉/碳掺杂二氧化钛胰岛素光电化学传感器的制备方法。该方法具体采用二氧化硅的空间位阻效应以及硫化铜对电子供体抗坏血酸的竞争消耗和对激发光源的竞争吸收效应，双重减弱基底硫化镉/碳掺杂二氧化钛敏化结构产生的光电流信号，实现对胰岛素的高灵敏检测。该方法具有制备简单、成本低、检测快速、灵敏度高、易于微型化的优点。

主权项

1.一种硫化铜/二氧化硅双重减弱硫化镉/碳掺杂二氧化钛胰岛素光电化学传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）碳掺杂二氧化钛纳米颗粒的制备0.5 ~ 2 mL钛酸四正丁酯溶于40 mL乙二醇，逐滴加入40 mL超纯水中，磁力搅拌30 min，于180 ℃水热反应6 ~ 24 h，降至室温，乙醇、水各洗3次，真空60 ℃干燥12 h；（2）硫化镉量子点的制备250 µL巯基乙酸加入50 mL、0.005 ~ 0.02 mol/L的氯化镉溶液，100 ~ 120 ℃于氮气氛围下鼓泡30 min，保持pH = 10 ~ 12，再将5.5 mL浓度为0.1 moL/L的硫化钠加入，氮气氛围下回流3 ~ 5 h即可；（3）光电化学传感器的制备1）将0.8 × 1.5 cm的ITO电极，依次用30 mL的丙酮、超纯水、乙醇超声清洗30 min，高纯氮气吹干；2）在ITO电极上修饰6 µL、2 ~ 8 mg/mL的碳掺杂二氧化钛溶液，将修饰好的ITO电极在400 ~ 500 ℃煅烧30 min；3）在修饰好的ITO电极表面滴加6 μL、2 ~ 8 mg/mL的硫化镉溶液，室温下自然干燥；4）滴加6 μL、10 ~ 20 mg/mL的1‑乙基‑（3‑二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐EDC和5 ~ 10 mg/mL的N‑羟基琥珀酰亚胺NHS混合溶液，室温下活化1 h；5）滴加 6 μL、5 ~ 20 μg/mL胰岛素捕获抗体至ITO电极表面，磷酸缓冲溶液PBS冲洗，4 ℃冰箱中晾干；6）滴加3 µL、质量分数为0.5 ~ 3%的牛血清白蛋白BSA溶液，PBS冲洗；7）滴加6 µL浓度为0.005 ~ 50 ng/mL的胰岛素抗原溶液，PBS冲洗电极表面，4 ℃冰箱中晾干；8）继续滴加6 µL、2 ~ 8 mg/mL的硫化铜/二氧化硅纳米复合材料标记的胰岛素抗体溶液于ITO修饰电极表面，室温孵化50 min，PBS清洗，制得胰岛素夹心型光电化学免疫传感器，于4 ℃冰箱中储存备用。