[发明专利]一种土壤中西瓜枯萎病菌的定量检测方法在审
| 申请号： | 201710270280.1 | 申请日： | 2017-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN107164462A | 公开（公告）日： | 2017-09-15 |
| 发明（设计）人： | 张晶;马艳;宋修超;郭德杰;王光飞;王秋君 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/06 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204 | 代理人： | 柏尚春 |
| 地址： | 210014 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种土壤中西瓜枯萎病菌的定量检测方法，包括如下步骤首先制备含不同浓度西瓜枯萎病菌的系列梯度标准土样；提取系列梯度标准土样和待测土样总DNA；使用特异性引物对系列梯度标准土样总DNA以及待测土样总DNA进行荧光定量PCR反应；根据系列梯度标准土样中西瓜枯萎病菌浓度和相应的Ct值制作标准曲线，计算待测土样中西瓜枯萎病菌浓度。本发明以西瓜枯萎病菌浓度已知的标准土样制作标准曲线进而定量检测待测土样中西瓜枯萎病菌浓度，所得结果单位为菌数每克土，操作步骤高效方便，能准确快速的检测出土壤中西瓜枯萎病菌浓度，宜于大规模推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 土壤 西瓜 枯萎 病菌 定量 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种土壤中西瓜枯萎病菌的定量检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备含不同浓度西瓜枯萎病菌的系列梯度标准土样；(2)利用土壤DNA提取试剂盒分别提取系列梯度标准土样和待测土样总DNA；(3)选定并合成可用于西瓜枯萎病菌定量检测的特异性引物，分别以步骤(2)提取的系列梯度标准土样总DNA以及待测土样总DNA为模板进行荧光定量PCR反应，分别得到系列梯度标准土样和待测土样的Ct值；(4)根据系列梯度标准土样中西瓜枯萎病菌浓度和相应的Ct值制作标准曲线，根据待测土样荧光定量PCR反应Ct值和标准曲线，即可计算出待测土样中西瓜枯萎病菌浓度。
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