[发明专利]一种快速的检测癌胚抗原的比色分析方法

摘要

本发明涉及医学中肿瘤标志物检测领域，具体是利用标记物构建比色免疫传感器，实现对癌胚抗原的检测。一种快速的检测癌胚抗原的比色分析方法，制备Ag₃PO₄/Ag纳米复合材料并将其修饰癌胚抗原抗体，制备Fe₃O₄/Ag纳米复合材料并将其修饰癌胚抗原抗体，将Fe₃O₄@Ag‑Ab₁纳米球分散液依次孵育不同浓度的癌胚抗原CEA 30分钟，然后用水清洗2‑5次，再用Ab₂‑Ag₃PO₄/Ag纳米球分散液孵育30分钟，构建成免疫传感器，加入ABS缓冲液和四甲基联苯胺TMB溶液，通过紫外分光光度计检测TMB的紫外吸收来定量CEA的浓度。

主权项

1.一种比色分析的快速的检测癌胚抗原的免疫传感器，其特征在于：按照如下的步骤进行步骤一、制备Ag₃PO₄/Ag纳米复合材料并将其修饰癌胚抗原抗体，将硝酸银和乙二醇溶液混合均匀形成第一溶液，将Na₂HPO₄·12H₂O 和乙二醇溶液混合均匀形成第二溶液，将第一溶液和第二溶液混合均匀后搅拌1‑3小时形成第三溶液，第三溶液在160°C 油浴条件下搅拌30分钟，通过离心和清洗，得到Ag₃PO₄/Ag 纳米球分散液，将CEA抗体加入到Ag₃PO₄/Ag 纳米球分散液中，在4 °C下孵育8‑12小时，磁性分离并清洗得到抗体标记的Ag₃PO₄/Ag 结合物即Ab₂‑Ag₃PO₄/Ag纳米球分散液；步骤二、制备Fe₃O₄/Ag纳米复合材料并将其修饰癌胚抗原抗体，将四氧化三铁和多巴胺加入到二次水中混合均匀，再将硝酸银加入到该混合溶液中，搅拌5‑7小时，通过磁性分离得到沉淀物，经清洗后得到Fe₃O₄@Ag 纳米球分散液，将CEA抗体加入到Fe₃O₄@Ag 纳米球分散液中，在4 °C下孵育8‑12小时，磁性分离并清洗得到抗体标记的Fe₃O₄@Ag 结合物即Fe₃O₄@Ag‑Ab₁纳米球分散液；步骤三、将Fe₃O₄@Ag‑Ab₁纳米球分散液依次孵育不同浓度的癌胚抗原CEA 30分钟，然后用水清洗2‑5次，再用Ab₂‑Ag₃PO₄/Ag纳米球分散液孵育30分钟，构建成免疫传感器，加入ABS缓冲液和四甲基联苯胺TMB溶液，通过紫外分光光度计检测TMB的紫外吸收来定量CEA的浓度，通过紫外分光光度计检测TMB的紫外吸收来定量CEA的浓度是指，根据CEA浓度与吸光度成线性相关性建立对应的线性方程为y=0.297 x + 0.176，x是CEA的浓度，单位是纳克/毫升，y是检测的吸光度。