[发明专利]一种改良CTAB抽提红景天RNA的方法在审
| 申请号： | 201710273256.3 | 申请日： | 2017-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN107287188A | 公开（公告）日： | 2017-10-24 |
| 发明（设计）人： | 韦玉军;李航;王文娟;苏军;吴远航 | 申请（专利权）人： | 安徽安龙基因医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 杭州君度专利代理事务所(特殊普通合伙)33240 | 代理人： | 王桂名 |
| 地址： | 230000 安徽省合肥市庐阳*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种改良CTAB抽提红景天RNA的方法，具体步骤为取新鲜或者‑80℃冷藏的红景天组织，加入液氮，研磨成粉；加入CTAB提取液，混匀，65℃裂解；得到苯酚、氯仿和异戊醇的混合液，加入等体积的苯酚、氯仿和异戊醇的混合液，涡旋振荡15～30sec，4℃下10,000g离心10min，取上清700ul移入新的1.5ml离心管，再加入等体积的氯仿与异戊醇的混合液，涡旋振荡15～30sec，4℃下10,000g离心10min；取上清1ml移入新的1.5ml离心管，加1/3体积8.0M Licl,颠倒混匀，‑20℃过夜；4℃下10,000g离心30min，弃去上清；采用1ml 70％乙醇洗涤沉淀2‑3次，4℃下10,000g离心10min，弃去上清，然后于室温放置5‑10分钟使其晾干；加入15ul的无核酸酶水溶解即可。本发明具有提取方便、高效、质量好等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 改良 ctab 红景天 rna 方法 | ||
【主权项】：
一种改良CTAB抽提红景天RNA的方法，其特征在于：具体步骤为：(1)、取1‑5g新鲜或者‑80℃冷藏的红景天组织，加入液氮，研磨成粉，并迅速转移至预冷的2.0ml离心管中；(2)、加入900ul CTAB提取液，混匀，65℃裂解10min，裂解时每管不多于0.2g，期间轻柔颠倒混匀2‑3次；(3)、将苯酚、氯仿和异戊醇混合在一起，得到苯酚、氯仿和异戊醇的混合液，向步骤(1)中制备得到的产品中加入等体积的苯酚、氯仿和异戊醇的混合液，涡旋振荡15～30sec，4℃下10,000g离心10min，取上清700ul移入新的1.5ml离心管，再加入等体积的氯仿与异戊醇的混合液，涡旋振荡15～30sec，4℃下10,000g离心10min；(4)、取上清1ml移入新的1.5ml离心管，加1/3体积8.0M Licl,颠倒混匀，‑20℃过夜；(5)、4℃下10,000g离心30min，弃去上清；(6)、采用1ml 70％乙醇洗涤沉淀2‑3次，4℃下10,000g离心10min，弃去上清，然后于室温放置5‑10分钟使其晾干；(7)、加入15ul的无核酸酶水溶解即可。
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