[发明专利]EB病毒感染淋巴细胞亚群的鉴定方法及其应用

摘要

本发明提供了一种EB病毒感染淋巴细胞亚群的鉴定方法及其应用，涉及医学检测的技术领域。本发明提供的EB病毒感染淋巴细胞亚群的鉴定方法，通过分选EBV感染患者外周血的单核细胞，联合流式细胞技术及实时荧光定量PCR技术，可以准确定位EBV感染的细胞类型，有助于临床医生针对EBV感染的细胞类型制定治疗方案，对EBV感染造成的疾病进行高效、准确的治疗；另外，应用本发明提供的鉴定方法，可以确定EBV感染的靶细胞，能够指导相关治疗药物的制备，有针对性的制备靶向药物。

主权项

1.一种用于指导制备治疗EB病毒感染疾病的药物的EB病毒感染淋巴细胞亚群的鉴定方法，其特征在于，所述鉴定方法包括以下步骤：步骤(a)，提取人外周血单个核细胞；步骤(b)，对所述人外周血单个核细胞进行分选，分别得到不同亚群分型的淋巴细胞；步骤(c)，用流式细胞仪验证分选得到的所述不同亚群分型的淋巴细胞的纯度；步骤(d)，分别提取所述不同亚群分型的淋巴细胞的DNA，并应用实时荧光定量PCR技术测定所述不同亚群分型的淋巴细胞中EB病毒DNA的含量；其中，步骤(b)中，所述不同亚群分型的淋巴细胞包括：CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD19+B淋巴细胞以及CD56+NK细胞；所述分选包括基于磁珠的分选；和/或，所述分选包括基于流式细胞仪的分选；所述基于磁珠的分选包括：将所述外周血单个核细胞按照1:1:1:2:2的比例分为五份，分别加入能够与CD3+T淋巴细胞、能够与CD4+T淋巴细胞、能够与CD8+T淋巴细胞、能够与CD19+B淋巴细胞以及能够与CD56+NK细胞特异性结合的磁珠，然后分别利用磁力架进行分选。