[发明专利]一种盐辅助-液液萃取分离中药在离体肠道菌中有效成分的方法

摘要

本发明公开了一种盐辅助‑液液萃取分离中药在离体肠道菌中有效成分的方法，属于生物检测技术领域。肠道菌群对中药有效成分的代谢是中药发挥疗效的一大重要环节。然而，由于中药化学成分复杂，肠道菌群培养液基质干扰大，使中药有效成分和肠道菌群相互作用的研究遇到了瓶颈。本发明通过盐辅助‑液液萃取技术分离中药在肠道菌群培养基中的目标化合物，其特征是向肠道菌群培养液中加入亲水性有机溶剂和适量可溶性无机盐或有机盐，混匀后静置分层。上层为富含目标化合物的有机溶剂层，下层为肠道菌群培养液层。该方法能有效降低生物基质及中药中其他非目标化合物的干扰，操作简便，成本低，为研究中药有效成分在肠道菌群中的代谢奠定了方法学基础。

主权项

1.一种盐辅助‑液液萃取分离中药在离体肠道菌中有效成分的方法，其特征在于包括以下步骤：离体肠道菌群是人或动物的粪便置于厌氧菌液体培养基中孵育一定时间后的菌群，向肠道菌群液中加入中药提取物，再次孵育一定时间后，加入与肠道菌反应体系互溶的亲水性有机溶剂停止反应，并加入适量可溶性无机盐或有机盐，混匀后于室温下静置，使其分层；上层为富含目标化合物的有机溶剂层，下层为肠道菌群培养液层，底部为析出的固体无机盐；所述可溶性无机盐或有机盐可以为氯化钠、甲酸铵、柠檬酸钠、乙酸铵、硫酸钠、硫酸镁、硫酸锌、氯化镁、氯化钾、碳酸钾、硫酸铵或氯化铵等；所述亲水性有机溶剂可以为乙腈、异丙醇、甲醇、乙醇、丙酮、二甲亚砜或乙腈‑水饱和正丁醇混合有机溶剂等。