[发明专利]一种高效提取核酸的方法

摘要

本发明公开了一种高效提取核酸的方法，涉及生物技术领域。所述方法包括将待测样本和高硬度微球置于核酸抽出液中，进行震荡，得到初次处理液；提取初次处理液离心后的初次上清液，然后将初次上清液与酸性缓冲液混合，得到二次处理液；将二次处理液离心得到二次上清液，将二次上清液与具有破细胞和核酸吸附双重功能的缓冲液混合，离心后，去除上清液，得到沉淀；清洗所述沉淀，室温干燥后得到核酸。本发明应用酸性缓冲液，比较彻底去除影响PCR扩增效率的杂质，提高扩增效率。

主权项

一种高效提取核酸的方法，其特征在于，所述方法包括：S1，将待测样本和高硬度微球置于核酸抽出液中，进行震荡，得到初次处理液；S2，提取初次处理液离心后的初次上清液，然后将初次上清液与酸性缓冲液混合，得到二次处理液；S3，将二次处理液离心得到二次上清液，将二次上清液与具有破细胞和核酸吸附双重功能的缓冲液混合，离心后，去除上清液，得到沉淀；S4，清洗所述沉淀，室温干燥后得到核酸；所述核酸抽出液中包括50～1000mmol/L LiCl、50～250mmol/L Tris‑HCl和SDS；所述SDS与所述核酸抽出液的重量体积比为0.5～2.5％；所述酸性缓冲液包括醋酸钠、醋酸和蒸馏水，醋酸钠与所述酸性缓冲液的重量体积比为(0.5～5)g：100mL；醋酸与所述酸性缓冲液的体积比为(5～20)：100；所述酸性缓冲液pH值小于4；所述含有破细胞‑核酸吸附双重功能缓冲液包括4～8mol/L胍盐类和体积占比为50％的异丙醇。