[发明专利]微生物核酸的定性和定量检测

摘要

本申请涉及微生物核酸的定性和定量检测。本发明涉及使用至少第一对照核酸、或不同浓度的第一和第二对照核酸来定性和定量检测微生物核酸的新的方法和用途。该方法基于核酸的扩增，优选地，聚合酶链式反应。进一步提供了包含用于实施所述方法和用途的组分的试剂盒。

主权项

一种用于同时检测及量化生物学样品中的微生物核酸的方法，所述方法包括：a)分离并纯化所述微生物核酸，b)提供反应混合物，其包含至少第一对照核酸、与所述微生物核酸的独特序列部分以及与所述对照核酸的独特序列部分特异性杂交的一种或多种引物对、和与每一种由所述一种或多种引物对扩增的序列特异性杂交的探针，其中所述微生物核酸和所述对照核酸与不同探针杂交，c)向所述反应混合物添加所述生物学样品，d)实施一个或多个循环步骤，其中循环步骤包括扩增步骤，所述扩增步骤包括若所述微生物核酸存在于所述样品中，则生成一种或多种自所述微生物核酸衍生的扩增产物，并且生成自所述对照核酸衍生的扩增产物，且其中循环步骤包括杂交步骤，所述杂交步骤包括使由所述引物对扩增的序列与所述探针杂交，其中所述探针用供体荧光模块和相应的接受荧光模块标记，且每种探针携带不同荧光染料，e)检测及测量由所述扩增产物生成并且与所述对照核酸和所述微生物核酸的浓度成比例的荧光信号，其中所述对照核酸的扩增产物的存在即使在缺乏所述微生物核酸的扩增产物的情况中指示所述反应混合物中发生扩增。