[发明专利]一种棕榈酰化修饰的半胱氨酸多肽的制备方法

摘要

本发明提供一种棕榈酰化修饰的半胱氨酸多肽的制备方法，该方法采用先合成棕榈酰化半胱氨酸做为多肽合成的氨基酸原料，即Fmoc‑Cys(Pal)‑OH，从而解决巯基与棕榈酸发生硫脂反应困难的问题，并且可对多个位点半胱氨酸棕榈酰化进行定点修饰；易于实验室进行，且适用性强；避免了半胱氨酸棕榈酸化液相修饰过程中的后处理过程，步骤简单，节约时间成本，并且避免了S‑棕榈酰不稳定因素。

主权项

一种棕榈酰化修饰的半胱氨酸多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)多肽Fmoc‑Cys‑OtBu与棕榈酸在第一溶剂中发生酰化反应，得到的中间体Fmoc‑Cys(Pal)‑OtBu，所述中间体去除保护基OtBu后，得到氨基酸序列如下的多肽片段：Fmoc‑Cys(Pal)‑OH；(2)将Wang Resin与活化后的氨基酸Fmoc‑Thr(tBu)‑OH在第二溶剂中发生反应，得到氨基酸序列如下的多肽片段：Fmoc‑Thr(tBu)‑Resin；(3)脱除步骤(2)中得到的连接有氨基酸的树脂Fmoc保护基，得到氨基酸序列如下的多肽片段：H‑Thr(tBu)‑Resin；(4)将步骤(3)中得到的H‑Thr(tBu)‑Resin与合成氨基酸Fmoc‑Cys(Pal)‑OH在第二溶剂中发生耦合反应，得到氨基酸序列如下的多肽片段：Fmoc‑Cys(Pal)‑Thr(tBU)‑Resin；(5)重复步骤(3)和(4)，依次反应下列氨基酸：Fmoc‑Thr(tBu)‑OH，Fmoc‑Lys(Boc)‑OH，Fmoc‑Trp(Boc)‑OH，Fmoc‑Tyr(tBu)‑OH，Fmoc‑Cys(Trt)‑OH，Fmoc‑Phe‑OH，Fmoc‑Lys(Boc)‑OH，得到氨基酸序列如下的多肽片段：H‑Lys(Boc)‑Phe‑Cys(Trt)‑Tyr(tBu)‑Trp(Boc)‑Lys(Boc)‑Thr(tBu)‑Cys(S‑Pal)‑Thr(tBu)‑Resin；(6)裂解步骤(5)中得到的多肽片段，经纯化，得到氨基酸序列如下的棕榈酰化修饰的半胱氨酸多肽：H‑Lys‑Phe‑Cys‑Tyr‑Trp‑Lys‑Thr‑Cys(S‑Pal)‑Thr‑OH。