[发明专利]一种法尼基修饰的半胱氨酸多肽的制备方法

摘要

本发明提供一种法尼基修饰的半胱氨酸多肽的制备方法，采用半胱氨酸特殊保护基4‑甲氧基三苯甲基及特定脱除条件，可定点，专一脱除半胱氨酸保护基而不对其他氨基酸保护基作用，仅半胱氨酸巯基游离，并作为唯一反应位点，从而避免副反应的发生，采用反,反‑法尼基溴作为法尼基修饰原料，可于固相体系中简单、高效的实现半胱氨酸法尼基修饰，从而达到合成目标产物的目的，工艺简单，结构确定，杂质少，利于纯化，收率高。

主权项

一种法尼基修饰的半胱氨酸多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将Wang Resin与活化后的氨基酸Fmoc‑Ser(tBu)‑OH在溶剂中发生反应，得到氨基酸序列如下的多肽片段：Fmoc‑Ser(tBu)‑Resin；(2)脱除步骤(1)中得到的连接有氨基酸的树脂Fmoc保护基，得到氨基酸序列如下的多肽片段：H‑Ser(tBu)‑Resin；(3)将步骤(2)中得到的H‑Ser(tBu)‑Resin与保护氨基酸Fmoc‑Ile‑OH发生耦合反应，得到氨基酸序列如下的多肽片段：Fmoc‑Ile‑Ser(tBu)‑Resin；(4)重复步骤(2)和(3)，依次反应下列氨基酸：Fmoc‑Val‑OH，Fmoc‑Cys(MMT)‑OH，Fmoc‑Ala‑OH，Fmoc‑Pro‑OH，Fmoc‑Asp(OtBu)‑OH，Fmoc‑Glu(OtBu)‑OH，Fmoc‑Met‑OH，得到氨基酸序列如下的多肽片段：H‑Met‑Glu(OtBu)‑Asp(OtBu)‑Pro‑Ala‑Cys(MMT)‑Val‑Ile‑Ser(tBu)‑Resin；(5)将二碳酸二叔丁酯与步骤(4)中得到的多肽片段在溶剂中发生反应，得到氨基酸序列如下的多肽片段：Boc‑Met‑Glu(OtBu)‑Asp(OtBu)‑Pro‑Ala‑Cys(MMT)‑Val‑Ile‑Ser(tBu)‑Resin；(6)脱除步骤(5)中多肽片段中的保护基4‑甲氧基三苯甲基，得到氨基酸序列如下的多肽片段：Boc‑Met‑Glu(OtBu)‑Asp(OtBu)‑Pro‑Ala‑Cys‑Val‑Ile‑Ser(tBu)‑Resin；(7)步骤(6)中得到的多肽片段与反,反‑法尼基溴在溶剂中发生反应，得到氨基酸序列如下的多肽片段：Boc‑Met‑Glu(OtBu)‑Asp(OtBu)‑Pro‑Ala‑Cys(farnesyl)‑Val‑Ile‑Ser(tBu)‑Resin；(8)裂解步骤(7)中得到的多肽片段，经纯化，得到氨基酸序列如下的法尼基修饰的半胱氨酸多肽：H‑Met‑Glu‑Asp‑Pro‑Ala‑Cys(farnesyl)‑Val‑Ile‑Ser‑COOH。