[发明专利]一种百子莲组织培养种苗繁育方法

摘要

本发明公开了一种百子莲组织培养种苗繁育方法，旨在提供一种商业化、规模化、工厂化繁育百子莲的种苗繁育方法，其技术方案要点是，包括如下培养步骤：S1:外植体选择；选用植株健壮、无病虫害的百子莲；S2：外植体消毒；S3：启动培养；将消毒完毕的外植体沿叶边纵切成两半，并分别横切成3～6mm的横切段，分别种接于启动培养基中；S4：增殖培养；将萌发的腋芽切除顶部叶片，并将腋芽切成直径为1～2cm的茎端，接种于固定增殖培养基内；S5：壮苗培养；在增殖培养基中增殖出的团芽，经过分割后转移到壮苗培养基内；S6:生根培养，将经过壮苗培养的组培苗，竖直插入生根培养基8～10mm。

主权项

1.一种百子莲组织培养种苗繁育方法，其特征在于：包括如下培养步骤：S1:外植体选择：选用植株健壮、无病虫害的百子莲，脱盆切除所有根系，用水冲洗根部沙土，切除全部叶片，留取基部长2～3cm根状茎，作为外植体；S2：外植体消毒：将外植体用吸水纸吸干水流冲洗时残留的水分，并在无菌操作台上使用医用酒精棉对外植体表面进行擦拭，并将其放入消毒液中消毒30～60分钟，浸泡期间轻轻摇晃外植体3～5次，然后放入无菌水中漂洗2～4次，静置1～5分钟后，使用无菌滤纸吸干表面的水分，完成消毒；S3：启动培养，将消毒完毕的外植体沿叶边纵切成两半，并分别横切成3～6mm的横切段，分别接种于启动培养基中，并转移到培养室中，进行启动培养8周，使得外植体上腋芽萌发，完成启动培养；S4：增殖培养：将萌发的腋芽切除顶部叶片，并将腋芽切成直径为1～2cm的茎端，接种于增殖培养基内，培养4周，获得增殖出的团芽，每隔4周将增殖出的团芽分割成单个芽，并重新增殖于增殖培养基中，进行扩量增殖；S5：壮苗培养，在增殖培养基中增殖出的团芽，经过分割后转移到壮苗培养基内，培养3周，使得单芽生长健壮，高度达到3cm，从而获得壮苗培养的组培苗；S6:生根培养，将经过壮苗培养的组培苗，竖直插入生根培养基8～10mm，在一定环境下进行培养8周，使得每株植株具有有效健壮的根2～5条，根长20～40mm；所述启动培养基由以下组份组成：每升水中添加花宝一号：1.0～2.0g；花多多1号：1.0～2.0g；椰子汁：50～100ml；6‑苄氨基腺嘌呤：0.5～6.0mg；萘乙酸:0.5～3.5mg；蔗糖：15～60g；琼脂：5.5～7.0g；培养室内环境温度25℃；暗培养4天；然后给予光照强度为2000Lux的光培养，每天光照16小时；所述增殖培养基由以下组份组成：每升水中添加MS培养基2.35g；噻苯隆TDZ：0.0025～0.03mg；吲哚乙酸:0.1～0.5mg；6‑苄氨基腺嘌呤：0.5～2.5mg；蔗糖：20～30g；琼脂：5.0～7.0g；增殖培养时所需环境为温度在25℃，暗培养4天；然后给予光照强度为2000Lux 的光培养，每天光照16小时；所述壮苗培养基由以下组份组成：每升水中添加MS培养基2.35g；蔗糖：20～30g；琼脂：5.0～7.0g；活性炭0.5～1.0g；壮苗培养所需 环境为温度在25℃，给予光照强度为2500Lux的光培养，每天光照16小时；所述生根培养基由以下组份组成：每升水中添加MS培养基2.35g；吲哚丁酸:0.5～2.0mg；萘乙酸:0.5～5.0mg；活性炭：0.5～1.0mg；蔗糖：15～30g；琼脂：5.0～7.0g。