[发明专利]HPV检测方法和试剂盒

摘要

本发明提供了对生物样品中的HPV核酸进行检测的方法,所述方法包含下述步骤(i)分别用14种HPV型别的特异性引物对和探针组中的引物来扩增样品中的核苷酸片段。(ii)使来自步骤(i)的扩增的片段分别接触上述14种HPV型别基因的特异性引物对和探针组中的探针，(iii)检测探针释放的信号，判断生物样品中是否存在HPV以及HPV的类型。本发明还提供了用于所述对生物样品中的HPV核酸进行检测的方法的试剂盒。

主权项

对生物样品中的HPV核酸进行检测的方法,所述方法包含下述步骤：(i)分别用以下14种HPV型别的特异性引物对和探针组合中的引物来扩增生物样品中的核苷酸片段，各型别特异性引物及探针序列如下:HPV16型：上游引物16E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:1，下游引物16E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:2，探针16E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:3；HPV18型：上游引物18E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:4，下游引物18E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:5，探针18E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:6；HPV31型：上游引物31E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:7，下游引物31E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:8，探针31E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:9；HPV35型：上游引物35E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:10，下游引物35E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:11，探针35E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:12；HPV45型：上游引物45E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:13，下游引物45E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:14，探针45E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:15；HPV52型：上游引物52E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:16，下游引物52E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:17，探针52E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:18；HPV56型：上游引物56E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:19，下游引物56E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:20，探针56E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:21；HPV59型：上游引物59E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:22，下游引物59E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:23，探针59E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:24；HPV66型：上游引物66E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:25，下游引物66E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:26，探针66E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:27；HPV68型：上游引物68E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:28，下游引物68E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:29，探针68E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:30；HPV33型：上游引物33E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:31，下游引物33E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:32，探针33E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:33；HPV39型：上游引物39E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:34，下游引物39E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:35，探针39E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:36；HPV51型：上游引物51E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:37，下游引物51E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:38，探针51E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:39；HPV58型：上游引物58E‑S1：核苷酸序列如SEQ ID NO:40，下游引物58E‑A1：核苷酸序列如SEQ ID NO:41，探针58E‑P1：核苷酸序列如SEQ ID NO:42；(ii)使来自步骤(i)的扩增的片段分别接触上述14种HPV型别基因的特异性引物对和探针组合中的探针，所述探针可识别和结合扩增产物中对应所述探针序列的片段；(iii)检测探针与扩增产物结合的情况，判断生物样品中是否存在HPV以及存在的HPV的型别。