[发明专利]一种猪源抗菌肽的提取方法

摘要

本发明公开了一种猪源抗菌肽的提取方法，首先将前处理后的猪小肠在80‑100℃的水中热处理15‑25s，达到提高原料使用率和反复冻融时细胞破碎更加充分的目的，然后制备猪小肠匀浆液，将匀浆液与注射用水按照质量比100∶90‑99混合均匀后反复冻融5‑6次，再将匀浆液与乙酸（分析纯）按照质量比100∶1‑10混合均匀，沸水浴，冷却离心，分别收集沉淀物和一次上清液，再将沉淀物与2.87%乙酸溶液按照质量比1∶0.8‑1混合均匀，冷冻离心，收集二次上清液体，上清液合并后依次经过切向流过滤，超滤，调节pH值并再次过滤，最终得到猪源抗菌肽。本发明方法能够提高原料的使用率，降低组织捣碎过程对仪器的损耗，同时使反复冻融时细胞破碎更加充分，提高猪源抗菌肽的提取率。

主权项

一种猪源抗菌肽的提取方法，其特征在于：其包括以下步骤：1) 取猪小肠，去除猪小肠表面的筋膜、脂肪组织和小肠内容物，用水冲洗干净，然后将猪小肠在80‑100℃的水中热处理15‑25s，冷却后用绞肉机绞碎，接着用胶体磨匀浆，得到猪小肠匀浆液；2）将上述匀浆液与注射用水按照质量比100∶90‑99混合均匀，然后将混合均匀后的匀浆液反复冻融5‑6次；3） 将反复冻融后的匀浆液与乙酸按照质量比100∶1‑10混合均匀，于4℃搅拌12小时后得到混合液，将混合液沸水浴8‑15min，然后将混合液置于冰水中冷却，离心，分别收集沉淀物和一次上清液，将一次上清液于4℃保存；4）将上述沉淀物与2.87%乙酸溶液按照质量比1∶0.8‑1混合均匀，于4℃搅拌12小时后得到浸提液，将浸提液在温度‑10℃以下，冷冻2‑4小时后离心，收集二次上清液体；5）合并一次上清液和二次上清液，将合并后的上清液依次经过0.22 μm‑0.45μm和5 kD‑10 kD滤膜进行切向流过滤，收集滤膜透过液，得到超滤液；调节超滤液pH值至3.0‑7.0之间，再经0.1μm‑0.22μm除菌滤器过滤，得到猪源抗菌肽。