[发明专利]一种基于钴纳米颗粒检测蛋白浓度的方法

摘要

本发明提供一种基于钴纳米颗粒检测蛋白浓度的方法，包括：(1)使用钴纳米颗粒修饰待检测物质的抗体；(2)将待测样品的单克隆抗体加到96孔板，恒温静置过夜；(3)弃去(2)中溶液，使用加吐温的磷酸盐缓冲液清洗两次96孔板；再向96孔板每孔加入不同蛋白浓度的标准样品，恒温静置；(4)弃去(2)中溶液，使用加吐温的磷酸盐缓冲液清洗两次96孔板；再向96孔板中的每孔加入待测样品，恒温静置；(5)弃去(3)和(4)中溶液，使用加吐温的磷酸盐缓冲液清洗两次96孔板；再向96孔板中的每孔加入钴纳米颗粒标记抗体，恒温静置等步骤。具有方便快捷检测、分析成本低、不需要大型分析仪器、灵敏度更高、检测结果更准确的特点。

主权项

一种基于钴纳米颗粒检测蛋白浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，使用钴纳米颗粒修饰待检测样品的抗体，得到钴纳米颗粒修饰抗体溶液；步骤二，将待测样品的单克隆抗体分别加入到96孔板的实验孔中，恒温静置过夜，将实验孔分为两组；步骤三，弃去步骤二中第一组实验孔中所得到的上层溶液，使用加吐温的磷酸盐缓冲液清洗96孔板中的试验孔；再向96孔板中第一组的每个实验孔中加入相同体积的、不同蛋白浓度的标准样品，恒温静置；步骤四，弃去步骤二中第二组实验孔中所得到的上层溶液，使用加吐温的磷酸盐缓冲液清洗96孔板中的试验孔；再向96孔板中的第二组的每个实验孔中加入待测样品，恒温静置；步骤五，分别弃去步骤三的第一组实验孔和步骤四的第二组实验孔中所得到的上层溶液，再使用加吐温的磷酸盐缓冲液清洗96孔板的实验孔；再向96孔板中的每个实验孔加入步骤一中所得钴纳米颗粒修饰抗体溶液，恒温静置；步骤六，弃去步骤五第一组、第二组实验孔中所得到的上层溶液，使用加吐温的磷酸盐缓冲液清洗96孔板的实验孔；再向96孔板中的每个实验孔加入无机酸水溶液，震荡；步骤七，从步骤六第一组、第二组每个实验孔中各取出相同体积的所得溶液，加入相对应至苏木精碱性溶液中；步骤八，检测第一组中不同蛋白浓度的标准样品的化学发光信号值，并根据浓度和发光信号值的关系做出定量曲线；步骤九，检测第二组中待测样品的发光信号值，将其信号值代入步骤八中所得的定量曲线中，得出待测样品中的蛋白浓度。