[发明专利]表达载体元件组合、新的生产用细胞产生方法及其在重组产生多肽中的用途在审
| 申请号： | 201710324350.7 | 申请日： | 2012-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN107119073A | 公开（公告）日： | 2017-09-01 |
| 发明（设计）人： | P·M·许尔斯曼;H·克内根 | 申请（专利权）人： | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/13;C07K16/00;C07K16/28 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所11247 | 代理人： | 凌立,黄革生 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本文报道，对于瞬时转染，人延伸因子1α启动子(含有内含子A)的使用提供增强的生产力(在LC‑HC‑SM组织中)，与使用SV40 polyA信号序列相比，牛生长激素polyA信号序列的使用提供增强的生产力，在包含hCMV启动子的载体中，向bGH PolyA信号序列加入HGT产生提高的生产力，载体组织LC(3`‑5′)‑HC‑SM产生改善的表达。对于稳定库，据报道，用包含hEF1α启动子的载体产生的库在分批分析中显示增强的生产力，用包含hEF1α启动子的载体产生的克隆显示减少的低产克隆数，且用包含hEF1α启动子的载体产生的克隆显示更高的IgG表达稳定性。对于单克隆，据报道，选择标记放置在下游的载体组织(LC‑HC‑SM)对单克隆的生产力具有积极作用，且用包含bGH polyA信号序列和hGT的载体产生的克隆具有更高的生产力。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 载体 元件 组合 生产 细胞 产生 方法 及其 重组 多肽 中的 用途 | ||
【主权项】：
用于选择重组瞬时转染哺乳动物细胞的方法，其包括以下步骤：a)用包含以下的表达载体转染哺乳动物细胞：‑按5’至3’方向包含hCMV启动子、编码抗体轻链的核酸、bGH polyA信号序列和hGT终止子序列的第一表达盒；‑按5’至3’方向包含hCMV启动子、编码抗体重链的核酸、bGH polyA信号序列和hGT终止子序列的第二表达盒；以及由此第一表达盒和第二表达盒双向排列，从而获得大量重组哺乳动物细胞；b)从所述大量重组哺乳动物细胞选择(单个)瞬时转染的重组哺乳动物细胞。
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