[发明专利]一种聚乙二醇偶联环形多肽iRGD和薯蓣皂苷元载药纳米粒子的制备

摘要

本发明涉及一种基于聚乙二醇偶联环形多肽iRGD和薯蓣皂苷元制备靶向性载药纳米粒子的方法。薯蓣皂苷元是一种有抗癌作用的天然药物，但由于其水溶性很差严重阻碍了它在临床上的应用。本方法提出一种iRGD‑聚乙二醇‑薯蓣皂苷元的偶联物（iRGD‑PEG‑DGN），其中，iRGD为一种基于二硫键循环的RGD肽，即C（CRGDKGPDC）环（半胖氨酸‑精氨酸‑甘氨酸‑天冬氨酸‑赖氨酸‑甘氨酸‑脯氨酸‑天冬氨酸‑半胖氨酸）；PEG为聚乙二醇；DGN为薯蓣皂苷元。本发明优点制备工艺简单；偶联物iRGD‑PEG‑DGN能准确靶向至肿瘤细胞；显著提高了薯蓣皂苷元的水溶性；降低其毒性并延长了其在生物体内的循环半衰期；并能够自组装形成外部亲水内部疏水的纳米粒子并包裹另一种疏水性药物羟基喜树碱(HCPT)，大大增强治疗效果。

主权项

一种基于聚乙二醇偶联环形多肽iRGD和薯蓣皂苷元靶向性载药纳米粒子的制备方法步骤如下：(1) 两亲性高分子载体聚乙二醇‑薯蓣皂苷元偶联物的制备：以薯蓣皂苷元为原料，在N2保护下，将薯蓣皂苷元、聚乙二醇溶于有机溶剂中，0°C下加入有机碱作为催化剂反应1h，然后移至室温下反应24 h；(2) 待反应结束后，将溶剂蒸干，加入DCM溶解，过滤除去沉淀，溶液中加入100 mL乙醚洗，过滤得到固体，用20 mL N,N‑二甲基甲酰胺/异丙醇（1:4（v/v））重结晶，滤去不溶物；(3) 产物用100 mL乙醚洗，过滤后滤液在磷酸缓冲盐溶液(PBS)中透析6 h，过滤冷冻干燥，然后得到纯度95%以上的聚乙二醇‑薯蓣皂苷元偶联物；(4) 得到的偶联物聚乙二醇‑薯蓣皂苷元与iRGD溶解在PBS中反应6 h,含有游离巯基的iRGD环形多肽与偶联物聚乙二醇‑薯蓣皂苷元中聚乙二醇一端的马来酰胺基团发生连接；产物用PBS透析3 h后冷冻干燥得到iRGD‑聚乙二醇‑薯蓣皂苷元的偶联物iRGD‑PEG‑DGN；(5) 载药纳米粒子的制备: 将(4)所述的iRGD‑聚乙二醇‑薯蓣皂苷元的偶联物与10‑羟基喜树碱（HCPT）分别溶在二甲基亚砜(DMSO)中，然后逐滴加入到高速搅拌的水溶液中自组装形成iRGD‑聚乙二醇‑薯蓣皂苷元/10‑羟基喜树碱载药纳米粒子（iRGD‑PEG‑DGN/HCPT，PBS透析3 h，滤膜过滤后，冷冻干燥。