[发明专利]一种显微镜下急性分离神经细胞捕捉方法

摘要

本发明提供一种显微镜下急性分离神经细胞捕捉系统及方法，涉及膜片钳封接细胞捕捉领域，特别适用于膜片钳实验中在显微镜下快速捕捉符合封接条件的急性分离的神经细胞。该系统包括显微镜电子目镜、计算机、单片机、驱动器、步进电机和膜片钳系统显微镜载物台。本发明提供的系统能够精确捕捉符合封接条件的神经细胞，将不符合封接条件的细胞予以剔除，并自动移动膜片钳系统显微镜载物台，使细胞移至显微镜视野中央，可大大节省膜片钳实验中寻找符合封接条件细胞的时间和精力，并使长时间在显微镜下工作实验人员避免出现头晕、恶心等不良反应，且加装在膜片钳系统中不影响其它任何操作，因此易于推广。

主权项

1.一种显微镜下急性分离神经细胞捕捉方法，其特征在于其采用显微镜下急性分离神经细胞捕捉系统进行，所述捕捉系统包括显微镜电子目镜(1)、计算机(2)、单片机(3)、驱动器(4)、步进电机和膜片钳系统显微镜载物台(7)，所述膜片钳系统显微镜载物台(7)，位于所述显微镜电子目镜(1)下方，用于承载待研究的急性分离神经细胞；所述显微镜电子目镜(1)，与计算机(2)连接，用于获取显微镜下细胞图像，并将获取的细胞图像传送至计算机(2)；所述计算机(2)与单片机(3)连接，用于对细胞图像进行处理得到单像素图像，识别和精确定位细胞，找出符合封接条件的急性分离的神经细胞，并获取其坐标值，然后将坐标值传输给单片机(3)；所述单片机(3)与驱动器(4)连接，用于根据获得的坐标值控制驱动器(4)驱动步进电机，使步进电机带动膜片钳系统显微镜载物台(7)移动，将细胞移动到显微镜的视野中；所述方法包括如下步骤：步骤一、电子目镜(1)获取显微镜镜下细胞图像，并将获取的细胞图像传送至计算机(2)；步骤二、所述计算机(2)对细胞图像进行处理得到单像素图像，识别和精确定位细胞，找出符合封接条件的急性分离的神经细胞，并获取其坐标值，然后将坐标值传输给单片机(3)；步骤三、所述单片机(3)根据获得的坐标值控制驱动器(4)驱动步进电机，使步进电机带动膜片钳系统显微镜载物台(7)移动，将细胞移动到显微镜的视野中；所述步骤二中识别和精确定位细胞，找出符合封接条件的急性分离的神经细胞具体过程为：对所述单像素图像使用Canny算子进行边缘检测，提取出细胞的边缘像素点；利用细胞形态与椭圆的相似性，使用RED算法从提取的边缘像素点中识别可能的椭圆；通过对椭圆点收集来判断是否为真实的椭圆，如果判断结果为是即捕捉到符合封接条件的急性分离的神经细胞。