[发明专利]基于离轴光束焦面共轭的荧光成像光切片方法和装置有效
| 申请号： | 201710326739.5 | 申请日： | 2017-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN107228846B | 公开（公告）日： | 2019-09-17 |
| 发明（设计）人： | 钟金钢;马骁 | 申请（专利权）人： | 暨南大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G02B21/00;G02B21/36 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 陈燕娴 |
| 地址： | 510632 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于离轴光束焦面共轭的荧光成像光切片方法和装置，该装置采用一个大数值孔径组合物镜和一个管镜构成无限远校正光学系统，组合物镜的物方焦面与管镜的像方焦面形成物象共轭面，相机光敏面设置在管镜的像方焦面；一个光栏设置在组合物镜的像方焦平面，阻挡近轴荧光光束成像，允许离轴荧光光束成像；样品内一个层面和组合物镜物方焦面重合，激发光源照明样品，激发的荧光被无限远校正光学系统成像，相机拍摄滤色器过滤后的荧光图像，获得样品内一个层面的光切片；平移器带动样品台在光轴方向移动，使得样品内的不同层面和组合物镜物方焦面重合，相机拍摄图像,获得样品内多个层面的光切片。本发明装置简单、成像速度快。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 光束 共轭 荧光 成像 切片 方法 装置 | ||
【主权项】：
1.一种基于离轴光束焦面共轭的荧光成像光切片方法，其特征在于，所述方法包括下列步骤：一个大数值孔径组合物镜和一个管镜构成无限远校正光学系统，组合物镜的物方焦面与管镜的像方焦面形成一对物象共轭面，相机的光敏面设置在管镜的像方焦面；一个光栏设置在组合物镜的像方焦平面，阻挡来自样品的近似平行组合物镜光轴的近轴荧光光束进行成像，允许与组合物镜光轴有夹角的离轴荧光光束进行成像；样品内的一个层面和组合物镜物方焦面重合，激发光源照明样品，样品发射出的荧光被无限远校正光学系统成像，相机拍摄经滤色器过滤后的荧光图像，获得样品内一个层面的光切片；承载样品的样品台在平移器的控制下，带动样品在组合物镜光轴方向移动，使得样品内不同的层面和组合物镜物方焦面重合，相机拍摄图像，获得样品内多个层面的光切片；其中，所述组合物镜的数值孔径NA的范围：0.75≤NA＜2.0。
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