[发明专利]一种检测鼠伤寒沙门氏菌的方法

摘要

本发明提供了一种检测鼠伤寒沙门氏菌的方法，其先将aptamer和primer形成拱形探针。然后将目标菌加入到反应后的均相溶液，在37℃孵育2h，目标物与aptamer结合，释放primer序列，打开HP，结合Helper，并完成之后的EXPAR过程，从而产生信号的放大。然后加入血红素、过氧化氢和ABTS，用光谱仪检测410 nm处紫外吸收。本发明提供的检测方法具有检测速度快，检测限低，特异性高等优点。

主权项

一种检测鼠伤寒沙门氏菌的方法，其特征在于，操作步骤如下：（1）将灭菌水，10×的buffer缓冲液、20 μM的aptamer 1 μL和20 μM的primer 1 μL加入到EP管中，在95℃下孵育5min，缓慢冷却至室温；（2）向EP管中加入目标菌，37℃，孵育2 h；（3）向EP管中加入20 μM ，1 μL HP和20 μM ，1 μL helper，1 μL内切酶、1 μL聚合酶和1 μL dNTP，震荡30 s，37℃，孵育2 h；（4）加入血红素、过氧化氢和ABTS反应5 min；用UV‑vis分光光度计在410 nm处检测ABTS紫外吸收信号，检测范围380nm‑680nm，读取信号变化，检测目标物；所述aptamer的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述primer核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述HP的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述helper的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。