[发明专利]高F值寡肽粗液分离纯化方法在审
申请号: | 201710329862.2 | 申请日: | 2017-05-11 |
公开(公告)号: | CN107164440A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 王斌;赵文浩;赵玉勤;丁冬各 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/14 |
代理公司: | 杭州浙科专利事务所(普通合伙)33213 | 代理人: | 吴秉中 |
地址: | 316000 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供了一种高F值寡肽粗液分离纯化方法,操作步骤为1)预处理;2)酶解;3)超滤;4)活性炭脱芳;5)凝胶层析;6)HPLC纯化。有益效果为活性炭成本相对较低,在生产过程中也不会产生污染,容易回收。由于颗粒活性炭的外表成不规则形,孔隙结构较复杂,对游离的芳香族氨基酸吸附效率较好,脱芳率较高,同时也可以起到很好的脱腥作用,有效地提高了高F值寡肽的品质;活性炭中掺杂纳米氧化铝和纳米氧化铁可增加其对游离的芳香族氨基酸的吸附率,提高寡肽F值;本发明的分离纯化方法,成本低廉,操作简单,绿色安全,适合大规模生产。 | ||
搜索关键词: | 寡肽 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
高F值寡肽粗液分离纯化方法,其特征在于以下步骤:1)预处理:将带鱼去头、去皮、去内脏,用清水冲洗干净,剪成小块,在去腥液中浸泡去腥,脱脂;2)酶解:采用胃蛋白酶和风味蛋白酶双步酶解,过滤得到高F值寡肽粗液;3)超滤:将步骤2得到的酶解液超滤,得到滤过液;4)活性炭脱芳:在滤过液中加入活性炭,搅拌,离心,将上清液冷冻干燥得到寡肽粉末;5)凝胶层析:将凝胶置于蒸馏水中浸泡,充分溶胀后倒入抽滤瓶,抽真空,装柱,平衡,将寡肽粉末溶于蒸馏水,上样,用超纯水洗脱,检测吸光度值,按峰合并,冷冻干燥;6)HPLC纯化:采用液相色谱仪,乙腈和超纯水为洗脱液进行梯度洗脱,收集洗脱液,冷冻干燥。
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