[发明专利]罗布麻花多糖、提取方法及其应用

摘要

本发明涉及一种罗布麻花多糖的提取方法，其包括如下步骤：1）罗布麻花先用石油醚脱脂，再用乙醇提取脂溶性组分，取滤渣加水于90±5℃进行热提，热提后醇沉，取沉淀依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤，冷冻干燥，然后用蒸馏水溶解，采用Sevag法脱除蛋白，将得到的上清液透析、冷冻干燥得到粗多糖；2）粗多糖经离子交换色谱和凝胶渗透柱色谱纯化后，得到四个多糖组分Vp1、Vp2a‑I、Vp2a‑II和Vp3。试验结果表明：罗布麻花精制多糖组分Vp1具有良好的促凝血效果，可以单独用于制备促凝血药物；罗布麻花精制多糖组分Vp3则具有良好的抗凝血效果，可单独用于制备抗凝血药物。

主权项

1.一种罗布麻花多糖的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：1）罗布麻花先用石油醚脱脂，再用乙醇提取脂溶性组分，取滤渣加水于90±5℃进行热提，热提后醇沉，取沉淀依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤，冷冻干燥，然后用蒸馏水溶解，采用Sevag法脱除蛋白，将得到的上清液透析、冷冻干燥得到粗多糖；2）粗多糖经离子交换色谱和凝胶渗透柱色谱纯化后，得到四个多糖组分Vp1、Vp2a‑I、Vp2a‑II和Vp3；步骤2）具体包括如下步骤：a）将粗多糖用蒸馏水溶解，0.45 μm微孔滤膜过滤，上样到DEAE‑52色谱柱，依次用蒸馏水、0.1 mol/L氯化钠溶液和0.2 mol/L氯化钠溶液进行洗脱，洗脱液采用苯酚‑硫酸法进行检测，测490 nm处的吸光度，以洗脱管数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制洗脱曲线，合并同一洗脱峰的多糖样品，减压浓缩，透析，冷冻干燥；其中，蒸馏水的洗脱峰为组分1，0.1 mol/L氯化钠溶液的洗脱峰为组分2，0.2 mol/L氯化钠溶液的洗脱峰为组分3；b）组分1用蒸馏水溶解，0.22 μm微孔滤膜过滤，上样到Sephadex G‑100色谱柱，用蒸馏水进行洗脱，采用苯酚‑硫酸法进行检测，测其在490 nm处的吸光度，以洗脱管数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制洗脱曲线，得到单一洗脱峰，减压浓缩、冷冻干燥后得到的多糖组分命名为Vp1；c）组分2采用步骤b）同样的方法进行洗脱，得到两组洗脱峰，减压浓缩、冷冻干燥后得到的多糖组分分别命名为Vp2a‑I、Vp2a‑II；d）组分3采用步骤b）同样的方法进行洗脱，得到单一洗脱峰，减压浓缩、冷冻干燥后得到的多糖组分命名为Vp3；罗布麻花多糖即为Vp1或Vp3。