[发明专利]一种基于纳米材料检测莱克多巴胺的电化学传感器

摘要

本发明公开了一种基于纳米材料检测莱克多巴胺的电化学传感器，本发明利用石墨烯材料容易分散、比表面积大，对电活性物质及生物分子的高负载量，提供更均匀、更大的电活性位点分布等优点，与纳米金粒子的生物相容性好和加速电子传输速率等优点相结合，制备复合纳米材料修饰在玻碳电极表面，有效提高所制备电化学免疫传感器的灵敏度。同时利用壳聚糖实现莱克多巴胺抗体在电极上的有效固定。制备过程中，对免疫反应的条件等参数进行优化，该传感器在0.3‑1.0×10³ng/mL浓度范围检测莱克多巴胺的线性关系良好，可用于实际样品中目标成分莱克多巴胺的检测。

主权项

1.一种基于纳米材料检测莱克多巴胺的电化学传感器，其特征在于，是在玻碳电极表面先后修饰上纳米金粒子和制备的石墨烯‑普鲁士蓝‑壳聚糖复合物，然后在修饰好的电极上滴加莱克多巴胺抗原，得到检测莱克多巴胺的电化学免疫传感器；具体制备方法如下：步骤1）石墨烯‑普鲁士蓝‑壳聚糖复合物的制备：是以壳聚糖和普鲁士蓝复合膜作为分散剂，分散石墨烯，得到的分散均匀的悬浊液；步骤2）玻碳电极的预处理：将玻碳电极分别在0.3和0.05µm的Al₂O₃粉悬浮液中分别抛光，在二次蒸馏水和乙醇的混合溶液中超声清洗10min，使其利用循环伏安法测定时Ep1‑Ep2£85mV的要求；步骤3）将纳米金粒子电沉积到玻碳电极上，是在1%HAuCl₄溶液中，利用计时电流法，将Au³⁺还原成Au，沉积到电极表面；用二次蒸馏水冲洗10min，除去物理吸附的Au，得到纳米金沉积电极；步骤4）将步骤1）制备得到的石墨烯‑普鲁士蓝‑壳聚糖复合物的制备修饰到步骤3）电镀纳米金的玻碳电极上，得到修饰好的玻碳电极；所述在修饰好的电极上滴加将10µL壳聚糖‑普鲁士蓝‑石墨烯复合物溶液滴加到电极表面，干燥2h；步骤5）再将10µL 100ng/ml 的莱克多巴胺抗原溶液滴加到修饰好的电极表面，干燥5小时；滴加10µL0.1%的牛血清白蛋白封闭电极表面的非特异性结合位点；得到莱克多巴胺电化学传感器；所述莱克多巴胺电化学传感器的两种试验条件莱克多巴胺固定抗原浓度、孵育时间进行了优化：莱克多巴胺的检测在固定抗原浓度为100ng/ml，孵育时间为40 min。