[发明专利]一种二乙醇胺脱氢产物中甘氨酸与亚氨基二乙酸的液相色谱定量分析方法

摘要

本发明公开了一种二乙醇胺脱氢产物中甘氨酸与亚氨基二乙酸的液相色谱定量分析方法，所选色谱分离条件使亚氨基二乙酸、甘氨酸和其它副产物完全分开，能准确定量二乙醇胺脱氢产物中的亚氨基二乙酸和甘氨酸的含量。在0.045～0.300g/L的甘氨酸浓度和0.010～0.150mg/L的亚氨基二乙酸浓度，外标法定量，亚氨基二乙酸与甘氨酸的浓度与峰面积呈严格的线性关系，线性相关系数在0.9999以上，相对标准偏差在1.5％以内。本发明分离度好，分析结果准确性和重复性高，色谱柱寿命长，能够满足研究和生产中的定量分析需求。

主权项

1.一种二乙醇胺脱氢产物中甘氨酸与亚氨基二乙酸的液相色谱定量分析方法，其特征在于：液相色谱条件：(1)色谱柱：Agilent ZORBAX SAX色谱柱；(2)流动相：A组分：浓度为0.02～0.04mol/L的磷酸氢二钾溶液，其pH值为2.0～3.0；B组分：浓度为100％的甲醇；(3)流动相浓度梯度：时间/min0～15，A组分流动相体积分数/％100～90，B组分流动相体积分数/％0～10(4)流动相流速梯度：时间/min0～15，流速/ml.min^‑10.3～1.6；(5)检测波长：200～210nm；(6)柱温：36～40℃；标准溶液、样品溶液的配制和定量分析方法：(1)标准溶液的配制：分别准确称取甘氨酸和亚氨基二乙酸标准样品，用超纯水配成浓度为0.045～0.300g/L和浓度为0.010～0.150mg/L的甘氨酸和亚氨基二乙酸系列浓度标准样品；(2)标准曲线的绘制：在上述液相色谱条件下，分别对甘氨酸和亚氨基二乙酸系列标准样品进行检测，以峰面积对标准样品浓度作图，得到甘氨酸和亚氨基二乙酸标准样品标准曲线；(3)甘氨酸和亚氨基二乙酸的回归方程分别为：N_Gly(A)＝1573.4C_Gly+1.894，R＝0.99991；N_IDA(A)＝972.0812C_IDA‑8.87896，R＝0.99993；(4)二乙醇胺脱氢产物样品的配制与测定：取二乙醇胺脱氢产物，用超纯水稀释至0.01～0.03％浓度，用超声波震荡混合均匀，并用磷酸溶液调节pH值至2.0～4.0，超纯水定容，用超声波震荡混合并脱气，配制成二乙醇胺脱氢产物样品；在上述液相色谱条件下，对二乙醇胺脱氢产物样品进行检测，连续进样五次，得到二乙醇胺脱氢产物的分析图谱；根据图谱所测出的甘氨酸和亚氨基二乙酸的峰面积，代入甘氨酸和亚氨基二乙酸的回归方程，计算得到二乙醇胺脱氢产物样品中甘氨酸和亚氨基二乙酸的含量；(5)二乙醇胺脱氢产物样品中甘氨酸和亚氨基二乙酸的含量计算公式：C_Gly＝n×(N_Gly(A)‑1.894)/1573.4C_IDA＝n×(N_IDA(A)+8.87896)/972.0812式中，C_Gly为每升二乙醇胺脱氢产物中甘氨酸的克数(g/L)，C_IDA为每升二乙醇胺脱氢产物中亚氨基二乙酸的克数(g/L)，n为二乙醇胺脱氢产物稀释的倍数，N_Gly(A)为二乙醇胺脱氢产物中甘氨酸的峰面积和N_IDA(A)为二乙醇胺脱氢产物中亚氨基二乙酸的峰面积。