[发明专利]一种潜在指纹中蛋白质成分的提取及显现方法有效
申请号: | 201710365905.2 | 申请日: | 2017-05-17 |
公开(公告)号: | CN107219367B | 公开(公告)日: | 2019-11-08 |
发明(设计)人: | 许林茹;刘鄂湖;吕志敏 | 申请(专利权)人: | 中国药科大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/535 |
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地址: | 211198 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种潜在指纹中蛋白质成分的提取及显现方法,属于痕量检测领域。将不同客体上残留的潜在指纹样本转移至SDS‑PAGE胶上;利用湿转方式将目标蛋白转移至PVDF膜;选择能够特异性识别目标蛋白的一抗与辣根过氧化物酶标记的二抗,利用抗体与目标蛋白的特异性反应,将辣根过氧化物酶连接到目标检测物上;进而利用化学发光显现出潜在指纹。本发明可以准确地提取潜在指纹中的蛋白质成分,同时可保留指纹的完整形貌,即具有成分识别和指纹显现双功能。本发明具有简单、高效、易操作的特点,对于潜在指纹中蛋白质类成分的分析和痕量潜在指纹的显现具有很好的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 潜在 指纹 蛋白质 成分 提取 显现 方法 | ||
【主权项】:
1.一种潜在指纹中蛋白质成分的提取及显现方法,包括步骤:1)将多孔纸质基底上残留的潜在指纹样本转移至SDS‑PAGE胶上;2)将指印样本上的目的蛋白转移至PVDF膜上;3)将步骤2)处理后的PVDF膜浸入脱脂牛奶中封闭0.5‑2h,然后清洗PVDF膜上过多的牛奶;4)向步骤3)处理后的PVDF膜上滴加一抗溶液进行孵育,孵育完成后清洗过多抗体;5)向步骤4)处理后的PVDF膜上滴加辣根过氧化物酶标记的二抗溶液进行孵育,孵育完成后清洗过多抗体;6)向步骤5)处理后的PVDF膜上滴加显影液,暗箱中显影,得到清晰的指纹图像。
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