[发明专利]一种靶向Ang-2基因抑制肺癌细胞的特异性shRNA的筛选方法有效
| 申请号： | 201710367068.7 | 申请日： | 2017-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN107142310B | 公开（公告）日： | 2021-06-29 |
| 发明（设计）人： | 陈建荣;姚敏;董志珍;杨绪莉;王理;姚登福 | 申请（专利权）人： | 南通市第一人民医院;南通大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/02;G01N33/574 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 陈娟 |
| 地址： | 226001 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了特异性shRNA筛选及其靶向Ang‑2基因抑制肺癌细胞的验证方法，经细胞复苏、细胞培养、细胞转染、干扰前后实时荧光定量PCR检测Ang‑2表达、干扰前后细胞中蛋白表达分析、CCK‑8方法检测干扰Ang‑2基因前后的肺癌细胞增殖能力及干扰前后细胞侵袭、迁移能力改变的检测的步骤完成对特异性shRNA的筛选及其靶向Ang‑2基因抑制肺癌细胞的验证；本发明实现筛选对Ang‑2基因转录干扰具有特异性Ang‑2‑shRNA1有效质粒转染肺癌细胞，同时能够验证了特异性shRNA靶向干扰Ang‑2能够有效抑制癌细胞的增殖、侵袭、迁移等生物学能力，为治疗肺癌提供一种新的治疗方向，抑制Ang‑2弥补抗VEGFR单一疗法的局限性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 靶向 ang 基因 抑制 肺癌 细胞 特异性 shrna 筛选 方法 | ||
【主权项】：
特异性shRNA筛选及其靶向Ang‑2基因抑制肺癌细胞的验证方法，其特征在于：经细胞复苏、细胞培养、细胞转染、干扰前后实时荧光定量PCR检测Ang‑2表达、干扰前后细胞中蛋白表达分析、CCK‑8方法检测干扰Ang‑2基因前后的肺癌细胞增殖能力及干扰前后细胞侵袭、迁移能力改变的检测的步骤完成对特异性shRNA的筛选及其靶向Ang‑2基因抑制肺癌细胞的验证；所述干扰前后实时荧光定量PCR检测Ang‑2表达具体步骤包括Total RNA提取、逆转录cDNA和荧光定量RT‑PCR。
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