[发明专利]凡纳滨对虾Na,K-ATPaseα亚基基因及SNP标记筛查的扩增引物和方法

摘要

本发明公开了凡纳滨对虾Na,K‑ATPaseα亚基基因及SNP标记筛查的扩增引物和方法。本发明针对凡纳滨对虾Na,K‑ATPaseα亚基的完整mRNA序列设计12对引物，通过PCR扩增、测序及序列拼接，获得凡纳滨对虾Na,K‑ATPaseα亚基的完整基因序列。针对所获得的序列分段设计引物，然后进行SNP位点筛查，共获得78个SNP位点。本发明建立了凡纳滨对虾Na,K‑ATPaseα亚基基因SNP标记开发的技术体系，为进一步筛选与凡纳滨对虾盐度抗逆相关的SNP标记和开发用于凡纳滨对虾亲子鉴定的分子标记奠定基础，从而加快凡纳滨对虾抗逆优良品种的选育进程。

主权项

一种凡纳滨对虾Na,K‑ATPaseα亚基基因扩增引物，其特征在于，包括12对扩增引物：引物对1：GLvNK‑F1：5’‑CACAGACGGTGAAGAATG‑3’；GLvNK‑R1：5’‑TGGGACCTTGTGCTCATC‑3’；引物对2：GLvNK‑F2：5’‑TGGAACTTGATGAGCACAA‑3’；GLvNK‑R2：5’‑GGCAATGAAGCAGAGGATA‑3’；引物对3：GLvNK‑F3：5’‑CTCCTGCTGTGGATTGGC‑3’；GLvNK‑R3：5’‑ATGAGAAGACGCCTGTGA‑3’；引物对4：GLvNK‑F4：5’‑GGAGCCCAACAAGGACAA‑3’；GLvNK‑R4：5’‑GACAGCATTGGTGGAGAA‑3’；引物对5：GLvNK‑F5：5’‑TTCTCCACCAATGCTGTC‑3’；GLvNK‑R5：5’‑GGCTACAATGATACCAATGAG‑3’；引物对6：GLvNK‑F6：5’‑TGTTGTGTTCCTCATTGGT‑3’；GLvNK‑R6：5’‑CAGTCTCGTGGATGGATAC‑3’；引物对7：GLvNK‑F7：5’‑CAAGTATCCATCCACGAGA‑3’；GLvNK‑R7：5’‑AGCCTTTGCTTCAGTGGG‑3’；引物对8：GLvNK‑F8：5’‑ATTCCCATCAAGGAGGTT‑3’；GLvNK‑R8：5’‑GGATGTTAGATGTCAGGGT‑3’；引物对9：GLvNK‑F9：5’‑CCTGACATCTAACATCCCTGAG‑3’；GLvNK‑R9：5’‑GCTTGTCGGTGAATGGGT‑3’；引物对10：GLvNK‑F10：5’‑CCTGCCATTTCCCTTGCC‑3’；GLvNK‑R10：5’‑CGCTCACGGAGACCAAAG‑3’；引物对11：GLvNK‑F11：5’‑ATCATGGCTGAGAACGGCTTCC‑3’；GLvNK‑R11：5’‑TGGAGAACGGAAGAGCAG‑3’；引物对12：GLvNK‑F12：5’‑TTCCGTTCTCCATCCTTA‑3’；GLvNK‑R12：5’‑ATGGAGCAGTAGTTGACC‑3’。