[发明专利]一种从牛脾脏中提取透明质酸酶的方法有效

专利信息
申请号: 201710374108.0 申请日: 2017-05-24
公开(公告)号: CN106967700A 公开(公告)日: 2017-07-21
发明(设计)人: 谭春萍 申请(专利权)人: 南宁学院
主分类号: C12N9/26 分类号: C12N9/26
代理公司: 贵阳派腾阳光知识产权代理事务所(普通合伙)52110 代理人: 谷庆红
地址: 530200 广西*** 国省代码: 广西;45
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摘要: 发明提供了一种从牛脾脏中提取透明质酸酶的方法,该方法将牛脾脏先经过一定浓度的生理盐水浸泡后加入提取液提取捣碎提取,然后离心取上清液加入氯化钠除杂,再加入盐盐析,最后经过透析制得精制透明质酸酶,本发明方法用于从牛脾脏中提取透明质酸酶,简化了步骤,易操作,透明质酸酶提取率高,纯度好,酶活力高,为透明质酸酶的提取探索了新的途径。
搜索关键词: 一种 脾脏 提取 透明质酸酶 方法
【主权项】:
一种从牛脾脏中提取透明质酸酶的方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)取新鲜牛脾脏,去除表皮包膜后,切成小块,加入2.0%生理盐水浸泡25‑35min,然后加入提取液,用组织捣碎机捣碎,放入‑8℃恒温箱中,用机械搅拌器搅拌,搅拌转速500‑600r/min,40‑60min后,‑3℃‑0℃静置1h,取上清液,加入氯化钠,0℃搅拌30‑50min后静置1‑2h,6000r/min离心15min,取上清液,加入盐,0℃搅拌50‑60min,然后静置8‑10h,9000r/min离心10min,取沉淀得透明质酸酶粗品;(2)取步骤(1)中的沉淀,装入透析袋中,放入柠檬酸‑氢氧化钠‑盐酸缓冲液中,5‑7℃透析12‑14h,8000r/min离心20min,取上清液,冷冻干燥,得透明质酸酶精品。
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