[发明专利]一种紫草素手性异构体的分离检测方法

摘要

本发明公开了一种紫草素手性异构体的分离检测方法，采用高效液相色谱的检测方法，以乙腈为流动相A，0.5％的冰醋酸为流动相B进行梯度洗脱，控制0.8‑1.2mL/min的流速，30℃的柱温，在512‑520nm的波长下进行检测并计算紫草素中两种异构体的含量。本发明的检测方法，操作简单方便、具有良好的精密度、重现性和稳定性，能够很好的分离检测出左旋紫草素和右旋紫草素，且数据直观可靠，适用于高纯度紫草素的分离检测，为紫草素手性异构体的分离检测以及应用研究提供了理论基础和有效检测方法。

主权项

一种紫草素手性异构体的分离检测方法，其特征在于采用高效液相色谱的方法进行检测，具体包括如下步骤：(1)对照品溶液的配制：精密称取紫草素对照品，用乙腈溶液进行溶解，配制成浓度为0.9‑1.2mg/mL的对照品溶液；(2)供试品溶液的配制：精密称取待测紫草素样品，加入乙腈溶液配制成浓度为0.9‑1.1mg/mL的供试品溶液，超声溶解，放置至室温，摇匀，即得；(3)液相色谱条件及系统适应性试验：手性柱(4.6mm×250mm，5μm)；以乙腈溶液为流动相A，以0.5％的冰醋酸溶液为流动相B，梯度洗脱；室温，柱温为30℃，流速0.8‑1.0mL/min，进样量20μL；检测波长为512‑520nm；其中流动相梯度为：在0‑5min段，乙腈的体积比例为60％‑65％，冰醋酸溶液体积比例为35％‑40％；在5至15min段，乙腈的体积比例为65％‑80％，冰醋酸溶液体积比例为20％‑35％；在15至30min段，乙腈的体积比例为80％‑90％，冰醋酸溶液体积比例为10％‑20％；(4)测定法：将按照步骤(1)和(2)制得的对照品溶液和供试品溶液在步骤(3)的色谱检测条件下注入高效液相色谱仪进行检测，记录色谱图，然后计算紫草素样品中异构体的含量。