[发明专利]一种猪胰岛细胞冻存液及冻存方法有效
申请号: | 201710374429.0 | 申请日: | 2017-05-24 |
公开(公告)号: | CN106982822B | 公开(公告)日: | 2018-01-09 |
发明(设计)人: | 王维;易受南;范立青 | 申请(专利权)人: | 湖南赛诺生物科技股份有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所43114 | 代理人: | 袁靖 |
地址: | 410600 湖南省长*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明属于细胞生物领域,具体公开猪胰岛细胞的冻存液及冻存方法。冻存液由基础培养基、猪血清、DMSO、过氧化氢酶、生育酚、海藻糖、Z‑VAD‑FMK组成。本发明冻存液减少了猪胰岛细胞冻存过程中的凋亡,能提高猪胰岛细胞的对抗恶劣环境的能力,使细胞的存活率增加。本发明冻存方法使用程序降温仪以温度>‑25℃时,1℃/min,‑25℃≥温度≥‑40℃时,0.25℃/min,‑40℃>温度≥‑80℃时,5℃/min的降温速度降温,减少冰晶的形成,更容易保护猪胰岛细胞。 | ||
搜索关键词: | 种猪 胰岛 细胞 冻存液 方法 | ||
【主权项】:
一种猪胰岛细胞冻存液,其特征在于,包括以下质量百分比的组分:基础培养基20‑40%,猪血清为40‑50%,DMSO为7~9%,其余为保护因子;所述的保护因子及其浓度分别为过氧化氢酶100~200μg/ml,生育酚10~50μg/ml,海藻糖0.01~0.1mml/L,细胞凋亡抑制剂Z‑VAD‑FMK10~30μΜ。
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