[发明专利]一种双特异性抗体及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201710375431.X | 申请日： | 2017-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN107129536A | 公开（公告）日： | 2017-09-05 |
| 发明（设计）人： | 孙瑞霞 | 申请（专利权）人： | 广州市拜沃思生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/30 | 分类号： | C07K16/30;C07K16/28;C12N15/85;C12N15/11;A61K39/395;A61P35/00 |
| 代理公司： | 广州一锐专利代理有限公司44369 | 代理人： | 李新梅 |
| 地址： | 510000 广东省广州市国际*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种双特异性抗体的制备方法，包括以下步骤根据引物扩增出抗体的重链恒定区序列、肝癌细胞表面抗原GPC3对应抗体的序列、免疫细胞表面抗原对应抗体的序列，其中，免疫细胞为NK细胞或T细胞，NK细胞表面抗原为CD16a，T细胞表面抗原为CD3；利用酶切、连接获得拼接序列；构建包含拼接序列的质粒，拼接序列为人源化处理后的序列；将质粒转染于哺乳动物细胞，筛选鉴定，以离子色谱法提取双特异性抗体。本发明还公开一种上述方法制备的双特异性抗体和该抗体的应用。本发明双特异性抗体为Fc单链构型，能够同时结合免疫细胞和肝癌细胞，提高杀瘤效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 特异性 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种双特异性抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：根据引物扩增出抗体的重链恒定区序列、肝癌细胞表面抗原GPC3对应抗体的序列、免疫细胞表面抗原对应抗体的序列，其中，所述免疫细胞为NK细胞或T细胞，所述NK细胞表面抗原为CD16a，所述T细胞表面抗原为CD3；扩增出的重链恒定区序列的一端和GPC3对应抗体的序列具有相同的酶切位点，扩增出的重链恒定区序列的另一端和免疫细胞表面抗原对应抗体的序列具有相同的酶切位点，利用酶切、连接获得拼接序列；构建包含拼接序列的质粒，所述拼接序列为人源化处理后的序列；将所述质粒转染于哺乳动物细胞，筛选鉴定，以离子色谱法提取双特异性抗体。
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