[发明专利]一种病理标本切片免疫组化操作方法及其系统

摘要

本发明公开了一种病理标本切片免疫组化操作方法及其系统，操作方法包括病理标本石蜡切片、病理标本烤片、病理标本切片脱蜡、病理标本切片抗原修复、病理标本切片染色、病理标本切片滴加抗体、病理标本切片显色、病理标本切片复染、病理标本切片封片和镜检等步骤。本发明采用先用苏木素进行染色滴加抗体Ⅰ、抗体Ⅱ，利于抗体的显色，且染色后滴入抗体便于把握组织的大小和位置，减小了滴加抗体时对位置把握的偏差，便于实验规范操作，具有较强的实际应用价值，能有效避免实际的浪费，也能很大程度上减小实验数据的误差。

主权项

一种病理标本切片免疫组化操作方法，其特征在于，包括以下几个步骤：(1)病理标本石蜡切片：取已制好的病理标本石蜡，用石蜡切片机切成2‑4μm的石蜡切片(2)病理标本烤片：55‑65℃恒温箱内烤带有病理标本石蜡切片的载玻片2h；(3)病理标本切片脱蜡：脱蜡前先将带有病理标本石蜡切片的载玻片在室温中放置60min，后用二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、二甲苯Ⅲ浸泡，每次5min，再将载玻片放置在无水酒精Ⅰ、无水酒精Ⅱ、无水酒精Ⅲ中浸泡，每次2min，再依次移至95％酒精Ⅰ、95％酒精Ⅱ、85％酒精中浸泡，每次2min，最后用PBS冲洗2min；(4)病理标本切片抗原修复：将冲洗干净后的载玻片放入高压锅中的PH为8.0的抗原修复液中20‑25min，自然冷却30min以上，PBS冲洗2‑3次，再移至到蒸馏水中浸泡2min，3％双氧水中浸泡8min，PBS冲洗2‑3次；(5)病理标本切片染色：采用苏木素染色2‑3min；(6)病理标本切片滴加抗体：在载玻片上滴加抗体Ⅰ，再放入孵育湿盒中，连同孵育湿盒一起放入2‑8℃冷藏冰箱中静置8‑10h，取出，室温中静置30min，PBS冲洗2‑3次，滴加抗体Ⅱ，再放入孵育湿盒中，连同孵育湿盒一起放入37℃恒温箱中静置40min，取出，室温中静置30min，PBS冲洗2‑3次；(7)病理标本切片显色：DAB显色3‑5min，在显微镜下控制染色的强度。(8)病理标本切片复染：苏木素染液复染1min，盐酸酒精分化3s，PBS冲洗5‑10分钟。(9)病理标本切片封片和镜检。