[发明专利]一种快速检测工业巴氏酵母芳香醇代谢基因的方法

摘要

本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种快速检测工业巴氏酵母芳香醇代谢基因的方法，包括总RNA的提取、逆转录反应制备cDNA模板、多重PCR反应、毛细血管电泳、产物片段分析，针对工业巴氏酵母芳香醇代谢相关基因ADH1‑Sc，ADH1‑Sb，ADH3‑Sc，ADH3‑Sb，ADH4‑Sc，ADH4‑Sb，ADH5‑Sc，ADH5‑Sb，ARO8‑Sc，ARO9‑Sc，ARO9‑Sb，ARO10‑Sc，ARO10‑Sb，ARO80‑Sc和ARO80‑Sb。本发明所采用的GeXP多重基因表达定量分析技术具有更强的特异性和灵敏性、自动化程度高等特点，保证了结果的可靠性和可重复性，大大缩短了实验时间。本发明有利于在不同生产条件下，控制发酵过程中芳香醇代谢及含量，提高啤酒的典型风味及一致性；并可以通过快速调整啤酒中芳香醇类风味，突出产品特色及进行新产品的开发。

主权项

一种快速检测工业巴氏酵母芳香醇代谢基因的方法，包括总RNA的提取、逆转录反应制备cDNA模板、多重PCR反应、毛细血管电泳、产物片段分析，其特征在于，针对工业巴氏酵母芳香醇代谢相关基因ADH1‑Sc，ADH1‑Sb，ADH3‑Sc，ADH3‑Sb，ADH4‑Sc，ADH4‑Sb，ADH5‑Sc，ADH5‑Sb，ARO8‑Sc，ARO9‑Sc，ARO9‑Sb，ARO10‑Sc，ARO10‑Sb，ARO80‑Sc和ARO80‑Sb，逆转录反应制备cDNA模板应用引物为SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.30，多重PCR反应中应用引物SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ I DNO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.27、SEQ ID NO.29。