[发明专利]一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法

摘要

本发明提供一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法，属于生物防治技术领域，包括蛤蟆菌的摇瓶种子培养、种子罐培养、发酵培养、发酵物提取。以提取物‑蛤蟆毒醇为基质辅以增诱成分，喷雾干燥，制粒成型等步骤。本发明主要研究蛤蟆菌发酵物中水溶性物质‑蛤蟆毒醇的提取工艺，并以蛤蟆毒醇为基质辅以增诱成分复配而成，具有对苍蝇毒力强，致死时间短，适口性强，耐药性低，对人畜安全性高，而不产生“三废”污染等优点，适用于家庭、宾馆、学校、医院、办公楼、畜禽养殖场、仓库等场所大规模灭蝇工作。

主权项

1.一种利用蛤蟆菌制备灭蝇剂的方法，其特征是包括以下步骤：1）选取蛤蟆菌斜面母种进行摇瓶种子培养，高压灭菌压力1kg/cm³保持30min,冷却后接种，接种量为一个斜面接6个装量为100ml 的250ml摇瓶，培养温度为24～26℃，旋转式摇床170～200转/分钟，培养时间为160～240h，菌球湿重20%以上；所用的培养基配方为：蛋白胨2克、酵母膏0.1克、麦芽糖1.5克、黄豆芽5克、磷酸二氢钾0.15克、硫酸镁0.075克、维生素B1 0.001克、PH值6.5、水1000ml；2）种子罐培养：接种量为5%～10%，温度为24～26℃，搅拌速度为150～180r/ min，通气量为每分钟1:0.5v/v. min，罐压0.3ⅹ10⁵pa，培养2～3天；所用培养基配方为：麦麸50克、蛋白胨2克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.3克、水1000ml；3）发酵培养：接种量为5%～10%，温度为24～26℃，搅拌速度为150～180r/ min，通气量为每分钟1:0.5v/v. min，培养5～6天；发酵液变稠，菌丝开始自溶，PH值降至4.5，残糖量降至0.3%，腺苷含量开始下降时即为发酵终点，放罐滤取菌丝体；所用培养基配方为：蔗糖20克、蛋白胨5克、葡萄糖20克、豆饼粉20克、磷酸二氢钾1.5克、硫酸镁0.75克、消泡剂1克、水1000ml；4）将步骤3）含菌丝体和发酵液的发酵物通过板框压滤分为菌丝体和滤液，菌丝体加一倍量水加热至80℃，保温1h，真空抽滤，去掉残渣，滤液与提取液合并，浓缩至相对密度1:1，即为蛤蟆菌浓缩液；5）按照蛤蟆菌浓缩液与水的体积比1:4，向步骤4）的蛤蟆菌浓缩液中注入90℃的清水，蛤蟆菌浓缩液浸泡在90℃恒温水中2小时，蛤蟆菌的毒素‑蛤蟆菌醇溶于水，过滤获得蛤蟆毒醇水溶液Ⅰ和滤渣Ⅰ；6）向步骤5）的滤渣Ⅰ中注入与步骤5）中等体积的90℃清水，保持2小时，过滤，获得蛤蟆毒醇水溶液Ⅱ和滤渣Ⅱ；7）将步骤5）的蛤蟆毒醇水溶液Ⅰ和步骤6）的蛤蟆毒醇水溶液Ⅱ混合，放入减压浓缩装置，设置减压浓缩装置的压强参数为60～65K pa,加热温度为85～90℃，浓缩至原溶液体积的5～10%，得到蛤蟆毒醇浓缩液；8）将步骤6）的滤渣Ⅱ用烘干机烘干至含水量小于23%；9）取炒熟有香味的玉米面与烘干后的滤渣Ⅱ按质量1:1混合，通过粉碎机粉碎成直径小于200目的混合颗粒，向混合颗粒中加入白糖，混合颗粒与白糖的质量比为25:1，获得药料；10）将步骤7）的蛤蟆毒醇浓缩液喷雾式喷洒在步骤9）的药料上，每千克药料喷洒1000ml蛤蟆毒醇浓缩液，并加入0.01克香油，搅拌10次以上，烘干机烘干至含水量55～60%；11）将步骤10）干燥后的药料放入制粒成型设备，制粒成型，即得。