[发明专利]7β-羟基甾醇脱氢酶突变体及其在熊脱氧胆酸合成中的应用有效
| 申请号： | 201710413074.1 | 申请日： | 2017-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN107099516B | 公开（公告）日： | 2020-04-07 |
| 发明（设计）人： | 李春秀;郑明敏;潘江;许建和;钱小龙 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学;苏州百福安酶技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12P33/00 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 褚明伟 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种通过分子进化获得的活性和稳定性提高的7β‑羟基甾醇脱氢酶突变体、含有7β‑羟基甾醇脱氢酶突变基因的重组表达质粒及重组表达转化子、重组突变体酶制剂的制备方法，以及该重组突变体酶制剂在熊脱氧胆酸合成中的应用。本发明的7β‑羟基甾醇脱氢酶具有出色的活性和热稳定性，可以高效催化7‑羰基石胆酸不对称还原制备熊脱氧胆酸；将本发明所述的7β‑羟基甾醇脱氢酶固定化后与固定化7α‑羟基甾醇脱氢酶酶法耦联，可以直接催化廉价底物鹅脱氧胆酸的差向异构，连续转化制备熊脱氧胆酸，操作简便。与现有报道相比，本发明的羟基甾醇脱氢酶催化制备熊脱氧胆酸，具有底物浓度高、反应时间短、反应完全，产品纯度高的优势，有很强的工业应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 羟基 脱氢酶 突变体 及其 脱氧 胆酸 合成 中的 应用 | ||
【主权项】：
一种活性及稳定性提高的7β‑羟基甾醇脱氢酶，其特征在于，其是将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的蛋白质的第57位甘氨酸、第128位甘氨酸、第163位异亮氨酸、第172位丙氨酸、第176位丝氨酸、第197位天冬酰胺、第200位甘氨酸、第243位天冬酰胺或第258位甘氨酸中的一个或多个氨基酸残基替换为其他氨基酸残基形成的新氨基酸序列的衍生蛋白质。
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