[发明专利]一种DNA银纳米簇及其细胞原位的合成方法和应用有效
| 申请号： | 201710417109.9 | 申请日： | 2017-06-06 |
| 公开（公告）号： | CN107340277B | 公开（公告）日： | 2020-02-18 |
| 发明（设计）人： | 田阳;董方圆;郑婷婷 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 | 代理人： | 董红曼 |
| 地址： | 200062 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用原位合成DNA银纳米簇的方法，通过上调细胞内谷胱甘肽(GSH)的水平，对细胞转染DNA，进而诱导细胞原位合成DNA银纳米簇。通过本发明所述方法原位合成的DNA银纳米簇具有极高的生物相容性，提高探针在生物体内的滞留时间，可以用于对细胞增殖与分化过程中端粒酶活性的长期监控。另外，本发明方法还可以通过更换不同序列寡核苷酸修饰银纳米簇作为多功能荧光探针，用来高灵敏检测细胞内其他功能分子如酶、葡萄糖、蛋白质、DNA等，可广泛应用于生物标记及疾病监测等领域。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 dna 纳米 及其 细胞 原位 合成 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种细胞内源DNA银纳米簇的原位合成方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)上调细胞内谷胱甘肽的水平培养细胞，待细胞覆盖率达75～85％左右时，加入琉辛酸进行共孵育；(2)检测细胞内GSH含量离心收集细胞，冻融破碎细胞，释放细胞中的GSH，测定GSH的含量；(3)转染DNA取步骤(2)已上调GSH含量的细胞，加入新鲜细胞培养液和转染液进行培养，去除培养液和转染液，加入新鲜细胞培养液继续培养；(4)诱导细胞原位合成DNA银纳米簇倒去培养液，加入AgNO3共孵育；然后用新鲜DMEM替换，陈化后即可实现细胞内源DNA银纳米簇的原位合成。
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