[发明专利]一种免标记磷光探针定量检测三磷酸腺苷的方法有效
申请号: | 201710423458.1 | 申请日: | 2017-06-07 |
公开(公告)号: | CN109001165B | 公开(公告)日: | 2020-11-20 |
发明(设计)人: | 李妍;熊艳;张菲;靳晴 | 申请(专利权)人: | 天津师范大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 天津创智天诚知识产权代理事务所(普通合伙) 12214 | 代理人: | 王秀奎;李薇 |
地址: | 300387 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种免标记磷光探针定量检测三磷酸腺苷的方法,先将Tris‑HCl缓冲溶液、ATP适配体、ATP溶液混合加高纯水定容,反应完成后,加入MPA包覆的Mn掺杂ZnS量子点母液混合均匀形成检测系统,其中的ATP适配体的基因序列为:(ACCTGGGGGAGTATTGCGGAGGAAGGT),ATP适配体使得量子点磷光猝灭,ATP与ATP适配体特异性结合,随着ATP的浓度增加,阻碍ATP适配体与量子点的结合,从而使得量子点磷光恢复,量子点的磷光恢复过程呈线性关系,其线性方程为:y=317.7+0.015x,其中y为磷光强度,x为检测体系中ATP的浓度,拟合度为0.95,线性范围为8‑9000nmol/L,最低检出限为6nmol/L。本发明的有益效果是:检测时间短,操作简单,结果直观,灵敏度高,准确度高。 | ||
搜索关键词: | 一种 标记 磷光 探针 定量 检测 磷酸 腺苷 方法 | ||
【主权项】:
1.一种免标记磷光探针定量检测三磷酸腺苷的方法,其特征在于:包括以下步骤:先将Tris‑HCl缓冲溶液、ATP适配体、ATP溶液混合加高纯水定容,反应完成后,加入MPA包覆的Mn掺杂ZnS量子点母液混合均匀形成检测系统,其中的ATP适配体的基因序列为:(ACCTGGGGGAGTATTGCGGAGGAAGGT),MPA包覆的Mn掺杂ZnS量子点具有磷光性质,ATP适配体使得量子点磷光猝灭,ATP与ATP适配体特异性结合,随着ATP的浓度增加,阻碍ATP适配体与量子点的结合,从而使得量子点磷光恢复,量子点的磷光恢复过程呈线性关系,其线性方程为:y=317.7+0.015x,其中y为磷光强度,x为检测体系中ATP的浓度,拟合度为0.95,线性范围为8‑9000nmol/L,最低检出限为6nmol/L。
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