[发明专利]一种促骨骼细胞发育型螯合钙的制备方法

摘要

本发明涉及一种促骨骼细胞发育型螯合钙的制备方法，属于有机钙领域。本发明通过将杜仲叶与三七叶混合提取并收集提取物，其中杜仲叶提取物有效提高成骨细胞的活性，促进骨细胞的分化和增殖，三七提取物有效促进毛细血管再生，改善局部微循环，两者协同作用，改善成骨细胞增殖环境后，与牛骨中煅烧制备的羟基磷酸钙和胶原蛋白复合，经酶解形成多肽，为成骨细胞分化增殖提供钙源和胶原多肽。本发明螯合钙利用度高，在提高吸收效率的同时，有效促进骨骼细胞的生长发育，值得推广与使用。

主权项

一种促骨骼细胞发育型螯合钙的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）按质量比1:5，将三七叶片与杜仲叶片混合并研磨过150目，得混合球磨颗粒，按质量比1:10，将混合球磨颗粒与去离子水混合，水浴加热并离心分离，收集上层清液并旋转蒸发得浓缩液，按体积比1:8，将浓缩液与无水乙醇混合，搅拌并静置陈化，过滤得滤液，旋转蒸发至干得干燥提取物，取1～2g干燥提取物、0.1～0.2mL吐温‑80、85～100mLDMEM细胞培养液搅拌混合并灭菌处理，得改性混合液；（2）取新鲜牛骨并研磨过20目筛，得牛骨颗粒并洗涤干燥，煅烧后碾磨并过200目筛，得煅烧牛骨粉末，按质量比1:10，将煅烧牛骨粉末与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，超声分散后静置，过滤得滤饼，得活化煅烧颗粒；（3）按质量比1:5，将胶原蛋白与质量分数1％磷酸氢二铵溶液混合，搅拌得胶原蛋白混合液，按质量比1:25，将胰蛋白酶添加至胶原蛋白混合液中，搅拌混合并调节pH至8.0，水浴加热制备得酶解混合液；（4）按重量份数计，分别称量45～50份酶解混合液、25～30份活化煅烧颗粒和15～20份改性混合液置于烧杯中，搅拌混合并加热至沸腾，保温加热后，旋转蒸发至干，碾磨并过80目筛，即可制备得一种促骨骼细胞发育型螯合钙。