[发明专利]一种整体生物酶解法制备海藻植物生长调节剂的方法

摘要

本发明涉及一种整体生物酶解法制备海藻植物生长调节剂的方法，包括生产前准备、原料的预处理、一级酶解、酶解液除杂、酶解液均质、二级酶解、后处理、促生长素的分离纯化、肥料终配等九个步骤。本发明利用商品复合酶对海藻进行酶解，克服了以往技术中酶解工艺前处理如海藻浸泡、清洗、除杂、剪切、研磨等的复杂性以及这些前处理带来的活性物质流失的弊端，直接对鲜海藻或干海藻整体进行温和高效的软化并酶解，最大程度地保留了海藻中的活性物质，保证了海藻肥的效果和品质。

主权项

一种整体生物酶解法制备海藻植物生长调节剂的方法，其特征在于包括以下步骤：1)生产前准备①准备原材料：准备完整的鲜海藻或干海藻、纤维素酶、褐藻多糖酶、蛋白酶、果胶酶、淀粉酶；②准备设备及工装：准备设置有温控装置的酶解罐、胶体磨或均质机、超声振荡设备、卧式螺旋卸料沉降离心机；③准备工艺辅材：单羟乙基胺、5％质量分数的氢氧化钾、一氯三嗪‑β‑环糊精；2)原料的预处理：若为鲜海藻则将新鲜海藻整体浸泡于1‑2倍重量的水中装入酶解罐，其中水中含有鲜海藻重量0.3％‑0.8％的无机盐并混合均匀，在温度40‑60℃与间歇性搅拌的条件下对海藻进行软化1‑3h，得到一种pH6.5‑pH7.5的海藻浆液；若为干海藻则将干海藻整体浸泡于5‑10倍重量的水中酶解罐，其中水中含有干海藻重量3％‑8％的无机盐并混合均匀，在温度40‑60℃与间歇性搅拌的条件下对海藻进行软化1‑3h，得到一种pH6.5‑pH7.5的海藻浆液。3)一级酶解将温度控制在35‑50℃，在海藻浆液中加入以海藻干重计1‑4％的纤维素酶，0.1‑0.3％的褐藻多糖酶，间歇式搅拌，酶解时间6‑12h，至酶解液pH5‑6时结束一级酶解；4)酶解液除杂在一级酶解过程中，待稠厚的海藻浆液粘度显著下降，可自由搅拌后，伴随酶解搅拌状态，将酶解体系在2个酶解罐间多次转换，借助沙石沉降进行酶解体系杂质的去除；5)酶解液均质将完成步骤3)和步骤4)，已基本液化的酶解海藻浆液，通过胶体磨或均质机进行进一步细化处理，使未彻底酶解的海藻颗粒细化至100nm‑10μm；6)二级酶解将步骤5)获得的均质酶解液调节至pH6.5‑pH7.5，温度调节至50‑60℃，加入海藻干重0.1％‑0.3％的蛋白酶，1‑3％的果胶酶，0.1％‑0.2％的淀粉酶，间歇式搅拌进行二级酶解，酶解时间2‑4h；7)后处理将步骤6)得到的酶解液通过卧式螺旋卸料沉降离心机进行固液分离，可获得固形物含量在3‑10％的海藻酶法提取液；8)促生长素的分离纯化①将单羟乙基胺投入7)获得的海藻酶法提取液中，再将混合后的浓缩液置入超声振荡设备，以300W‑350W的功率振荡35min‑40min，获得终末浆料；②将终末浆料静置至水溶液和有机溶液自然分层，分离出有机溶液和水溶液；③采用一氯三嗪‑β‑环糊精浸入有机溶液中，以每10S间隔搅拌10S，搅拌速率100r/min‑150r/min的搅拌工艺搅拌1.5h‑2h，即可吸附出所需植物生长调节剂；④采用5％质量分数的氢氧化钾对吸附有植物生长调节剂的一氯三嗪‑β‑环糊精进行净化处理，分离杂质，即获得被吸附的高纯促生长素；⑤采用去离子水浸泡吸附的高纯植物生长调节剂进行水解离，并在水解离容器外施加强度为330V/m‑350V/m的直流电场，35min‑40min后取出一氯三嗪‑β‑环糊精，留于去离子水中的即为分离出的高纯促生长素；9)肥料终配①将8)中步骤⑤获得的促生长素与8)中步骤②获得的水溶液分开保存和使用，即获得所需整体生物酶解法制备海藻植物生长调节剂。